在质粒提取实验中,Solution I 是不可或缺的初始试剂,作为质粒提取流程的“第一道防线”,其核心作用是温和重悬细菌沉淀、保护质粒完整性,为后续细菌裂解、质粒分离奠定基础。它适配常规质粒提取的全流程,组分配比精准,可有效维持质粒的天然构象,减少降解,直接影响质粒提取的产量与纯度,是分子生物学实验中质粒相关研究的核心辅助试剂。
Solution I 的核心价值源于其三大组分的协同作用,各组分功能明确、针对性强,精准适配质粒提取的初始需求:25 mM Tris-HCl(pH8.0)构建稳定的缓冲环境,维持体系pH稳态,避免质粒因酸碱失衡发生构象改变或降解;10 mM EDTA 作为金属离子螯合剂,螯合溶液中的二价金属离子,抑制核酸酶活性,防止质粒被降解;50 mM Glucose 维持体系渗透压平衡,温和保护细菌细胞膜与质粒,避免重悬过程中因渗透压剧烈变化导致质粒断裂、细菌提前裂解。
Solution I(质粒提取,1 L 装)的精准配方:
Solution I(质粒提取,1 L 装)精准配方.pdf
⚠️ 实验关键注意事项:
1. 无菌控制:Solution I 直接接触过夜培养的细菌沉淀,必须严格进行高温高压灭菌,彻底去除杂菌污染,避免杂菌影响质粒提取纯度与产量。
2. 重悬要求:实验中,Solution I 用于重悬细菌沉淀,重悬必须充分,确保无肉眼可见的菌块,否则会导致后续细菌裂解不完全,显著降低质粒提取量。
3. RNase A 添加:RNase A 需在Solution I 灭菌冷却后、使用前添加,不可与Solution I 一同灭菌,避免RNase A 失活,无法有效去除RNA杂质。
4. 保存规范:灭菌后的Solution I 4℃密封保存,有效期不超过1个月;添加RNase A 后的Solution I 需现配现用,避免RNase A 活性下降,影响实验效果。
售后与福利:

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