革新传统提取工艺：超快速无毒RNA柱式提取试剂盒

在分子生物学研究中，RNA提取质量直接决定RT-PCR、qRT-PCR、转录组测序等实验的稳定性。传统提取方法依赖酚-氯仿等有毒试剂，操作繁琐、耗时久，且易导致RNA降解。超快速无毒细胞/组织RNA柱式提取试剂盒，创新融合硅胶膜纯化技术与无毒缓冲体系，以极速提取、安全无毒、高纯完整RNA为优势，为科研工作者提供一种更高效、安全、可靠的RNA提取方案。

一、核心原理

试剂盒基于硅胶膜离心柱纯化技术，结合无毒裂解与缓冲体系，实现RNA的高效分离与纯化。

（一）高效裂解与RNase灭活

无毒裂解液（无酚、无氯仿、无β-巯基乙醇）可快速裂解细胞膜与组织基质，释放细胞内RNA；同时裂解液中特殊变性成分能灭活RNase，从源头避免RNA降解，解决传统方法中RNA易降解的问题^[1]。

（二）硅胶膜特异性吸附

裂解后^[2]溶液经乙醇调节离子浓度，在高盐环境下，RNA表面水分子层脱落，暴露的磷酸骨架与硅胶膜表面硅羟基形成特异性疏水吸附作用，而蛋白质、多糖、脂质、基因组DNA等杂质无法吸附，随溶液流出。

（三）漂洗与洗脱

漂洗液可去除残留盐离子、蛋白质及微量DNA污染，搭配柱上DNase，彻底消除DNA干扰，避免PCR假阳性；用纯水在低盐环境下破坏RNA与硅胶膜的吸附作用，洗脱后获得高纯度、高完整的RNA。

二、特点优势

（一）超快速提取

提取时间^[3]远超传统酚-氯仿法（40-60min）。无需孵育和反复离心，只需样本“裂解-上柱-漂洗-洗脱”四步即可完成，96孔板样本可批量同步处理，大幅缩短实验周期，适配高通量实验。

（二）无毒安全

彻底摒弃苯酚、氯仿、β-巯基乙醇、DEPC水等有毒试剂^[4]，所有组分均为无毒配方，操作时无需通风、无有毒气体挥发、无废液污染，不仅保障科研人员身体健康，还符合实验室环保标准。

（三）获取高纯完整RNA

² 高纯度：A260/280比值稳定在1.9-2.1，A260/230比值≥2.0，无蛋白质、多糖、盐离子残留，基因组DNA残留量＜0.1%。

² 高完整性^[5]：提取RNA无降解，28S/18S rRNA比值≈2.0，mRNA等小片段RNA完整保留。

（四）广谱适配样本

² 动物细胞样本：贴壁细胞、悬浮细胞、原代细胞、干细胞、肿瘤细胞等，适配细胞用量5×10⁴~5×10⁶个；

² 动物组织样本：哺乳动物心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、脂肪、皮肤等组织，同时适配昆虫、鱼类等生物软组织，样本用量1~20mg；

² 体液类样本：新鲜全血、血清、血浆、淋巴细胞、腹腔积液、细胞上清液等；

² 微生物样本：革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等细菌；

（五）操作简单，普适性强

全程常温（15-30℃）操作，无需离心机和研磨设备，实验小白亦能快速上手，实验结果稳定，适配高校实验室、药企研发实验室、第三方检测机构等场景。

三、使用方法

（一）样本准备

1. 细胞样本：取1×10⁵-5×10⁶个细胞，离心弃上清，加入300μL裂解液，振荡30s，室温静置1min；

2. 组织样本：取5-20mg新鲜/冷冻组织，液氮研磨后加入300μL裂解液，充分匀浆，室温静置2min。

（二）吸附

向裂解液中加入300μL无水乙醇，轻轻混匀后转移至RNA吸附柱，12000×离心30s，弃收集管中废液。

（三）漂洗

1. 向吸附柱中加入500μL漂洗液RW₁，12000×离心30s，弃废液；

2. 向吸附柱膜中加入5μL DNase I，室温孵育5min，加入500μL漂洗液RW₂，12000×离心30s，弃废液；

3. 空柱12000×离心2min，去除残留乙醇。

（四）洗脱

将吸附柱转移至干净1.5mL离心管，向膜中央滴加50-100μL纯水，室温静置1min，12000×离心1min，即获得高纯RNA，可直接用于实验或-80℃长期保存。

四、注意事项

1. 防RNase污染：全程使用无酶离心管和枪头，操作时戴一次性手套、口罩，避免直接接触吸附柱膜；实验台面用75%乙醇擦拭，防止RNase污染导致RNA降解；

2. 样本新鲜度：新鲜样本优先提取，冷冻样本需-80℃保存，避免反复冻融；组织样本在取材1小时内处理，或立即液氮冷冻，减少RNA降解；

3.乙醇添加：必须加入等体积无水乙醇，乙醇浓度不足会导致RNA吸附率降低，浓度过高会增加杂质残留，必须严格按说明书操作；

5. 储存条件：试剂盒于15-30℃可保存12个月，DNase I需2-8℃保存，避免高温失效；提取的RNA可短期-20℃保存，长期需-80℃分装保存，防止降解。

产品推荐：杭州富沃克生物科技有限公司提供超快速无毒细胞/组织RNA柱式提取试剂盒产品：

1.组织细胞基因组DNA提取试剂盒柱式法 硅胶柱提取RNA DNA核酸提取

参 考 文 献

[1] Qiagen. RNeasy Plant Mini Kit Technical Specification[EB/OL]. 2024.

[2] Thermo Fisher Scientific. PureLink RNA Mini Kit User Guide[EB/OL]. 2023.

[3] Genstar. StarSpin Fast Cell RNA Kit Performance Data[EB/OL]. 2025.

[4] Vazyme. RNA-easy Isolation Reagent Application Note[EB/OL]. 2024.

[5] TianGen. RNA Purification Kit Experimental Manual[EB/OL]. 2025.

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