3M 醋酸钠 – 乙酸钠溶液(100ml 配制)
用途说明
用于DNA/RNA乙醇或异丙醇沉淀中的盐析,中和核酸分子上的负电荷,促进核酸在醇类溶剂中有效沉淀。
工作液浓度
3M 醋酸钠(乙酸钠)
配制方法(100ml 体系)
称取40.8 g NaOAc·3H₂O(三水合乙酸钠),置于100~200 ml烧杯中。
加入约40 ml去离子水,搅拌至完全溶解。
滴加冰醋酸(冰乙酸),边加边搅拌,调节pH至5.2(用pH计校准)。
加去离子水定容至100 ml,充分混匀。
高温高压灭菌(121℃,20 min),室温密封保存。
关键操作要点
pH精确调节:pH 5.2是乙醇沉淀中核酸回收的最佳pH条件,建议使用pH计校准,不可仅用pH试纸估算。
温度与结晶:低温环境(如4℃或冬季室温过低)下溶液可能出现结晶析出,属正常现象。使用前置于室温或37℃水浴中复温,待晶体完全溶解并恢复澄清后即可使用,不影响效果。
本溶液可直接用于核酸沉淀:通常按核酸溶液体积的1/10体积加入(如300 μl核酸溶液加入30 μl 3M醋酸钠),混匀后加入2.5倍体积无水乙醇沉淀。
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