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血液一抽就凝?细胞实验总翻车?抗凝液可能没用对

发布时间:2026-07-16      点击次数:4

血液一抽就凝?细胞实验总翻车?抗凝液可能没用对

做血液相关实验的同学都懂——好不容易从动物身上采到新鲜血液,还没来得及处理就凝固了;或者加了抗凝剂,提取的基因组DNA得率却低得可怜。你换了采血方式、调了离心参数、检查了所有试剂,最后发现是抗凝液压根儿就没用对。

柠檬酸葡萄糖溶液B(ACD-B)是血液保存中最经典的“抗凝守护者”——螯合钙离子阻止凝血、为红细胞提供能量、通过抗凝保护血细胞完整性,间接为后续DNA提取提供高质量样本。那ACD-B到底是什么?怎么用才靠谱?

一、柠檬酸葡萄糖溶液B(ACD-B)是什么?

柠檬酸葡萄糖溶液B,全称Acid-Citrate-Dextrose Solution B,简称ACD-B,是一种由柠檬酸、柠檬酸钠和葡萄糖按特定比例配制的无菌抗凝溶液【1】【2】。ACD保存液是1943年研发的经典血液保存液【2】,主要用于全血和红细胞的液态保存【2】。

ACD-B的核心功能有三重【1】【2】:

1. 柠檬酸钠:螯合血液中的钙离子(Ca²⁺),阻断凝血级联反应,防止血液凝固

2. 柠檬酸:维持溶液微酸性(pH约5.0),防止葡萄糖在高温灭菌时焦化

3. 葡萄糖:为红细胞代谢提供能量,延长红细胞的保存时间

ACD溶液分为A和B两种处方。A处方浓度较高(每升含柠檬酸8.0g、柠檬酸钠22g、葡萄糖24.5g),每100mL血液需加15mL;B处方浓度约为A的一半(每升含柠檬酸4.8g、柠檬酸钠13.2g、葡萄糖14.7g),每100mL血液需加25mL。两者在4℃均可保存血液21天。

⚠️ ACD-A vs ACD-B怎么选? ACD-A浓度高、用量少,适用于常规采血和血液保存;ACD-B浓度约为A的一半,每100mL血液需加25mL保存液,适用于需要更温和抗凝条件的实验场景【2】。

二、配方成分与表格【1】【2】【3】

ACD-B标准配方(配制1 L) :

组分

浓度(w/v)

配制用量(1 L)

柠檬酸(C₆H₈O₇·H₂O)

0.48%

4.8 g

柠檬酸钠(Na₃C₆H₅O₇·2H₂O)

1.32%

13.2 g

葡萄糖(C₆H₁₂O₆·H₂O)

1.47%

14.7 g

注射用水

定容至1 L

最终pH约为5.0【2】。自行配制时可采用0.22 μm过滤除菌或121℃高压灭菌15分钟【1】【2】【3】,确保溶液无菌。

三、ACD-B怎么用?——操作指南【1】【3】

使用比例:每6 mL新鲜血液加入1 mL ACD-B溶液,轻轻颠倒混匀【1】【3】。

操作步骤【1】:

1. 采血前准备:将ACD-B溶液恢复至室温,取适量置于无菌离心管中。

2. 采血:按6:1的比例采集新鲜血液(如6 mL血 + 1 mL ACD-B)【1】。

3. 混匀:立即轻轻颠倒混匀5-8次,避免剧烈振荡(防止溶血)。

4. 保存:2-6℃保存,可保存21天【2】。

5. DNA提取:取抗凝血直接用于基因组DNA提取实验。

 

 关键提醒【1】【2】【3】:

1. 无菌操作是关键——ACD-B为无菌溶液,使用过程中需注意防止污染【1】。

2. 4℃密封保存,有效期一年【1】【3】——未开封的ACD-B溶液4℃保存有效期一年;分装使用可避免反复开启污染。

3. 本产品仅供科研使用——不得用于临床诊断或治疗。

4. 为了您的安全和健康——请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

四、商业化便捷选择——杭州富沃克生物【3】

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  自己配制ACD-B虽然配方清晰,但柠檬酸、柠檬酸钠的精确称量、无菌过滤的规范操作——每一步都影响抗凝效果和样本质量。如果追求省心省力,可以直接选择成熟的商业化产品。

杭州富沃克生物科技有限公司推出的柠檬酸葡萄糖溶液B(ACD,无菌) ,采用0.48%柠檬酸、1.32%柠檬酸钠、1.47%葡萄糖科学配比,以超纯水在洁净环境中精准配制,0.22 μm过滤除菌,无DNase/RNase污染。适用于新鲜血液抗凝处理、基因组DNA提取、血细胞保存等科研实验。每6 mL新鲜血液加1 mL混匀即可。4℃密封保存,有效期一年,即开即用,省去自行配制的繁琐与批次波动风险。

产品名称

规格

产品货号

柠檬酸葡萄糖溶液B

50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml

NMS606-01—NMS606-05

 

邮箱:support@fwkbio.com

厂家联系微信号:19850855600

官网链接:柠檬酸葡萄糖溶液B 强效抗凝缓冲液 无菌 科研试验用 富沃克生物-杭州富沃克生物科技有限公司

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参考文献

[1] 柠檬酸葡萄糖溶液B (ACD, 无菌)(ST496-100ml)产品说明书[EB/OL]. 碧云天生物技术. https://r.beyotime.com/product/ST496-100ml.htm

[2] ACD保存液[EB/OL]. 百度百科. https://baike.baidu.com/item/ACD保存液

[3] 柠檬酸葡萄糖溶液B 强效抗凝缓冲液[EB/OL]. 杭州富沃克生物科技有限公司. https://www.fwkbio.com/list_21/100.html

 


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