基础试剂不简单：氯化钠溶液配制全攻略

做核酸提取、蛋白纯化或者细胞实验的朋友都懂——DNA沉淀不出来、蛋白盐析没效果、细胞渗透压不对。你换了试剂、调了温度、检查了操作手法，最后发现问题出在氯化钠溶液本身。

氯化钠溶液（也叫生理盐水、高盐溶液）是生物医药和分子生物学实验室最基础也最常用的试剂之一，广泛应用于核酸提取、蛋白纯化、细胞培养、免疫检测等场景【2】。浓度不对，实验直接翻车。

那这个溶液到底是什么？怎么配才靠谱？今天一文讲清楚。

一、氯化钠溶液是什么？

氯化钠溶液是由氯化钠（NaCl） 溶于水制成的基础盐溶液，化学式NaCl，分子量58.44【4】。

它的核心作用是调节渗透压和控制离子强度【6】：

1. 维持渗透压：0.9%氯化钠溶液与哺乳动物体液等渗，是经典的生理盐水，广泛用于细胞培养和动物实验【2】

2. 调节离子强度：高浓度NaCl溶液用于DNA高盐沉淀（2 mol/L）、蛋白盐析（饱和溶液）等场景【3】

3. pH缓冲能力弱：氯化钠溶液呈中性（pH 6.7~7.3），本身不具备缓冲能力，如需维持特定pH需配合缓冲体系使用【6】

二、常见浓度与配方

不同实验场景对氯化钠浓度要求不同，以下是最常用的几种配方【1】【2】：

⚠️ 重要提示：以下鸟类（0.75%）、两栖类（0.65%）浓度仅指NaCl单一成分含量，完整生理盐水配方还包含KCl、CaCl₂、NaHCO₃等其他盐类，请勿直接用纯NaCl溶液替代完整生理盐水进行动物实验。

三、配制步骤（以0.9%生理盐水1 L为例）

1. 计算：配制1 L 0.9% NaCl溶液，需NaCl = 1000 mL × 0.9% = 9.0 g【1】

2. 称量：用分析天平称取9.0 g氯化钠（精确到0.1 g即可）【4】

3. 溶解：将NaCl加入约800 mL去离子水（或蒸馏水）中，搅拌至完全溶解【2】。

4. 配制2 mol/L及以下浓度时，室温搅拌即可完全溶解。

5. 配制饱和溶液时，可适当加热（≤50℃）促进溶解，冷却至室温后如有晶体析出，取上清液过滤使用。

6. 检查溶解完全：定容前确认烧杯底部无未溶解颗粒，否则需继续搅拌。

7. 定容：加去离子水定容至1 L，充分混匀【1】

8. 分装灭菌：如需无菌，可121℃高压蒸汽灭菌15~20分钟（NaCl溶液耐热，可高压灭菌）【2】。

⚠️ 关键操作：高压灭菌会导致水分蒸发，灭菌后冷却至室温，用无菌去离子水补足至原体积，以保证浓度准确。

保存：常温密闭保存，避免水分蒸发导致浓度升高，保质期可达12个月以上【3】。建议小量分装，避免反复开瓶污染。

四、关键提醒

⚠️ 区分浓度单位：生理盐水指质量体积比（w/v），即0.9 g/100 mL。不要与摩尔浓度（mol/L） 混淆【1】。

⚠️ 动物差异要注意：哺乳类用0.9%，鸟类用0.75%，两栖类用0.65%——用错了会导致细胞溶血或皱缩【2】。且鸟类/两栖类完整配方还需添加其他盐类。

⚠️ 称量要精准：配制高浓度溶液（如2 mol/L）时，建议用分析天平称量，误差控制在±0.1 g以内【4】。

⚠️ 饱和溶液温度敏感：NaCl溶解度随温度变化显著，室温（25℃）饱和浓度约为36.0 g/100 mL水（质量分数约26.5%）。4℃会有晶体析出，使用前需恢复至室温并充分摇匀或过滤【5】。

⚠️ pH检查：纯NaCl溶液pH约6.7~7.3，如偏离可用稀HCl或NaOH微调，但NaCl本身无缓冲能力，调节后pH可能因CO₂吸收而再次漂移【6】。如需稳定的pH环境，建议改用含缓冲体系的溶液（如PBS），或现用现调。

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参考文献

[1] 苏州市教育科学研究院. 实验活动5 一定溶质质量分数的氯化钠溶液的配制

[2] 常用药品试剂和培养基的配制——生理盐水. 丁香通

[3] 2M氯化钠溶液产品说明. 杭州富沃克生物

[4] 氯化钠滴定溶液标准物质. 普天同创

[5] 饱和NaCl溶液产品说明. 杭州富沃克生物

[6] 傅献彩等. 《物理化学》（第五版）. 高等教育出版社