实验室“万能溶剂”：甘油溶液配制全攻略

做蛋白电泳、菌种保存或者生化实验的朋友都懂——样品沉不下去、菌种冻存存活率低、配好的溶液放几天就变质。你换了试剂、调了比例、反复尝试，最 后发现是甘油溶液浓度根本没搞对【1】。

甘油溶液是生物化学实验室最常用的试剂之一，广泛应用于蛋白电泳上样缓冲、菌种甘油冻存、蛋白质稳定剂等场景【2】。浓度不对，实验全垮【2】。

那这个溶液到底是什么？怎么配才靠谱？今天一文讲清楚【5】。

一、甘油是什么？

甘油，化学名丙三醇（C₃H₈O₃） ，CAS号56-81-5，分子量92.09【1】。它是一种无色、味甜、澄明的黏稠液体【1】，能从空气中吸收潮气【1】。它与水和乙醇能以任意比例混溶【1】。

实验室核心用途【2】：

1. 蛋白电泳上样缓冲：5%~10%甘油增加样品密度，使样品沉入凝胶孔底【2】

2. 菌种甘油冻存：20%~30%甘油作为冷冻保护剂，防止冰晶损伤细胞【2】

3. 蛋白质稳定剂：防止蛋白质聚集和变性【2】

4. 梯度凝胶制备：辅助形成浓度梯度【2】

二、常见浓度与配方【3】【4】

不同实验场景对甘油浓度要求不同，以下是最常用的几种配方【5】：

浓度单位说明：上表中“%”指体积百分比（v/v） ，即甘油体积/溶液总体积×100%【5】。甘油密度约1.25 g/mL【1】。如需配制质量百分比（w/w）溶液（如30g甘油+70g水），需按质量比直接混合，而非定容至100mL【5】

⚠️ 注意：配制菌种冻存液时，甘油终浓度通常为20%~30%【2】。实际操作中常用50%甘油储备液与菌液按1:1比例混合，使甘油终浓度达到20%~30%【2】。

三、配制方法【5】

方法一：体积法（最常用，适合日常实验）【5】

方法二：质量法（适用于配制v/v溶液时精确称量）【5】

如需精确浓度，建议采用质量法【5】，用分析天平称量后定容【5】。如需配制w/w溶液，应按质量比直接混合（如30g甘油+70g水）。

四、关键提醒【1】【2】【3】【4】【5】

⚠️ 甘油极易吸湿【1】：甘油能从空气中吸收水分【1】，配制和保存时必须密封、干燥、避光【1】，减少开盖频次【1】。

⚠️ 黏度大，移液要耐心【1】：纯甘油黏度较高【1】，移取时容易挂壁、取样不准【1】。建议恒温放置降低黏度后使用【1】，选用宽口枪头慢速吸液，多次润洗枪头【1】。

⚠️ 注意无菌操作【3】：用于细胞实验或菌种保存的甘油溶液【2】，建议使用无菌甘油【3】或配制后过滤除菌（0.22μm滤膜）【3】。

⚠️ 灭菌方式：甘油溶液可采用高压灭菌（121℃, 15-20分钟），但有文献指出高压灭菌可能导致甘油分解，更推荐使用0.22μm滤膜过滤除菌。如需高压灭菌，建议灭菌后观察溶液是否变色或出现异常。

⚠️ 配制环境要洁净【5】：操作区域需保持无尘，器皿必须彻底清洗并干燥【5】。配制完成的溶液应储存于密封良好的试剂瓶中【5】。

⚠️ 低温可能分层【5】：低温环境下甘油溶液可能出现轻微分层【5】，使用前应室温回暖并充分混匀【5】，避免冷冻存放【5】。

五、常见问题【1】【2】【5】

六、省心之选：杭州富沃克生物

自己配甘油溶液看似简单，但黏度大移液不准、浓度换算易出错、无菌难保证——每一步都可能影响实验结果【1】【2】【5】。

杭州富沃克生物科技有限公司推出的甘油溶液系列，采用高纯度甘油原料搭配去离子水精制，配比精准、批次稳定、杂质含量低，即开即用【6】。

邮箱：support@fwkbio.com

厂家联系微信号：19850855600

官网链接：甘油溶液-杭州富沃克生物科技有限公司

参考文献

[1] 甘油(99%, Reagent grade)产品说明. 碧云天（beyotime.com）

[2] 甘油——做辅助也是一把好手. biomart.cn, 2022

[3] 甘油溶液(75%,无菌)产品说明. 伊塔生物, 2025

[4] 甘油溶液(50%,无菌)产品说明. 南京森贝伽生物

[5] 稀甘油试液配制方法. 39健康网, 2025

[6] 高纯甘油溶液产品说明. 杭州富沃克生物（fwkbio.com）, 2026