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6X loading buffer

简要描述:6X Loading Buffer是一种即用型核酸电泳上样缓冲液,含有溴酚蓝和/或二甲苯青等指示染料,能实时显示电泳进程。缓冲液中的EDTA能稳定核酸,部分配方还包含SDS等成分以促进DNA变性。广泛用于琼脂糖凝胶电泳,简化流程并提升结果的可视化与可靠性。

  • 产品型号:
  • 更新时间:2026-01-25
  • 访  问  量:148

详细介绍

6X DNA Loading Buffer | 6×DNA上样缓冲液 | 琼脂糖凝胶电泳专用 | 溴酚蓝指示剂 | 核酸电泳染料

别名:6×凝胶加样缓冲液、DNA电泳上样缓冲液、6倍浓缩DNA上样缓冲液

一、产品概述

富沃克生物推出的6X DNA Loading Buffer(6×DNA上样缓冲液)是一款高品质的分子生物学级核酸电泳专用试剂。本产品采用溴酚蓝(Bromophenol Blue)与二甲苯青FF(Xylene Cyanol FF)双指示剂作为电泳示踪染料,甘油作为增密剂确保样品沉入点样孔底部,EDTA作为金属离子螯合剂有效抑制核酸酶活性,保护DNA完整性。产品以超纯水为基质,经无菌处理,开瓶即用,有效避免自行配制时组分不准、比例失衡及污染问题

在琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中,DNA样品在上样前必须与上样缓冲液混合。这一看似简单的步骤承载着多重关键功能:增加样品密度确保DNA沉入孔底、通过指示剂颜色实时追踪电泳进程、螯合金属离子保护DNA免受核酸酶降解。传统实验室自行配制6X DNA Loading Buffer需要精确称量多种组分、调节pH值、反复验证指示剂比例,步骤繁琐且批次间一致性难以保证。本产品正是针对这一核心痛点而开发——以标准化生产替代人工配制,以即用型液体形式提供组分精准、性能稳定的6X DNA上样缓冲液,让科研人员将精力聚焦于核心实验而非基础试剂的配制。

本产品适用于琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中DNA样本的制备,上样前按1:5比例与样品混合即可。需4℃冷藏保存,现货供应,欢迎分子生物学实验室及科研单位老师选购。

二、技术原理

本产品的核心设计围绕“增密沉降、双色示踪、核酸保护”三大功能展开,各组分协同作用,为核酸电泳提供全方位的技术支持。

甘油——确保样品沉入孔底:甘油(Glycerol)是本产品中增加样品密度的关键组分,常见浓度为36%-60%(v/v)。DNA样品本身的密度与电泳缓冲液相近,若直接上样,样品会因扩散作用而飘出点样孔,无法在孔内聚集。甘油的高密度特性使混合后的样品比重显著大于电泳缓冲液(如TAE、TBE),确保DNA样品在加入点样孔后能够顺利沉降到底部,形成紧密的起始条带。这一功能是获得清晰、集中电泳条带的前提条件。

溴酚蓝与二甲苯青FF——双色实时示踪电泳进程:本产品含有溴酚蓝和二甲苯青FF两种指示剂。这两种染料带有微弱的负电荷,在电泳过程中会与DNA样品一样向正极方向迁移,但迁移速率不同。通过肉眼观察这两种染料条带在凝胶中的位置,实验人员可以实时判断DNA片段的迁移情况,从而适时终止电泳

两种染料的迁移速率与特定长度的DNA片段相对应。在1%琼脂糖凝胶中,溴酚蓝的迁移速率约与300 bp的双链线性DNA相当二甲苯青FF的迁移速率约与4000 bp(4 kb) 的双链线性DNA相当。具体迁移速率与凝胶浓度和缓冲液体系有关

染料TAE缓冲液(1%琼脂糖)TBE缓冲液(1%琼脂糖)
溴酚蓝~370 bp~220 bp
二甲苯青FF~4160 bp~3030 bp

这一双色指示系统使实验人员能够根据实验目的灵活判断终止电泳的时机——当需要观察小片段DNA时,可参考溴酚蓝的位置适时终止;当需要观察大片段DNA时,则可参考二甲苯青FF的迁移位置

EDTA——螯合金属离子,保护DNA完整性:EDTA(乙二胺四乙酸)是本产品中保护DNA免受降解的核心组分,常见浓度为30-60 mM。其作用机制在于螯合溶液中的Mg²⁺、Ca²⁺等二价金属离子。这些二价阳离子是DNase(脱氧核糖核酸酶)发挥活性所必需的辅因子。EDTA通过去除这些金属离子,使DNase失去活性中心,从而有效保护DNA样品在上样和电泳过程中不被降解。这一保护机制对于从酶反应体系(如PCR产物、酶切产物)中直接取样的DNA样品尤为重要

三、核心优势

1. 双指示剂系统,电泳进程一目了然

溴酚蓝与二甲苯青FF双色指示剂可清晰指示电泳进程。两种染料迁移速率不同,分别对应约300 bp和4000 bp的DNA片段迁移位置。实验人员可根据实验目的灵活选择终止电泳的时机——监测小片段时参考溴酚蓝,监测大片段时参考二甲苯青FF。两种染料在紫外光下无荧光,不会干扰DNA的紫外检测

2. 高密度配方,确保样品沉入孔底

含甘油成分,6倍浓缩设计稀释至1×后比重仍然较大。加样后样品迅速沉入凝胶加样孔底部,有效防止样品飘出点样孔。尤其适合低浓度琼脂糖凝胶或需要长时间加样的操作场景。

3. EDTA双重保护,保障样品质量

EDTA螯合金属离子,有效抑制DNase活性,保护DNA样品在上样和电泳过程中不被降解。尤其适合从酶反应体系(如PCR产物、酶切产物)中直接取样的DNA样品

4. 6×浓缩液,使用灵活经济

6倍浓缩设计,使用时按1:5比例稀释即可。一瓶可配制大量1×工作液,经济实惠,储存占用空间小。

5. 超纯水配制,品质可靠

以超纯水为基质配制,经无菌处理,不含核酸酶。确保DNA样品在上样和电泳过程中不被降解,保障实验结果的准确性

6. 兼容多种电泳体系

适用于常规双链DNA的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。可用于PCR产物检测、质粒分析、酶切产物鉴定、基因组DNA检测等多种实验场景

7. 即开即用,彻底告别繁琐配制

自行配制6X DNA Loading Buffer需要精确称量溴酚蓝、二甲苯青FF、EDTA等多种组分,调节pH值,反复验证指示剂比例。本产品开瓶即可直接使用,无需称量、溶解、调pH等繁琐步骤,显著节省实验准备时间,彻底杜绝配制过程中的组分偏差和污染风险

四、技术参数

参数项目规格说明
产品名称6X DNA Loading Buffer / 6×DNA上样缓冲液
浓缩倍数
主要组分30 mM EDTA、36%(v/v)甘油、0.05%(w/v)二甲苯青FF、0.05%(w/v)溴酚蓝
指示剂溴酚蓝 + 二甲苯青FF(双染料)
增密组分甘油
螯合剂EDTA
适用电泳类型琼脂糖凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
适用核酸类型双链DNA
溴酚蓝指示位置(1%琼脂糖)TAE: ~370 bp;TBE: ~220 bp
二甲苯青FF指示位置(1%琼脂糖)TAE: ~4160 bp;TBE: ~3030 bp
保存条件4℃可保存12个月,-20℃可长期保存
包装规格多种规格可选

五、主要应用场景

应用领域具体用途
PCR产物检测PCR扩增产物的大小验证与定性分析
质粒DNA分析质粒DNA的构型鉴定与质量评估
酶切产物鉴定限制性内切酶消化产物的电泳检测与分析
基因组DNA检测基因组DNA的完整性评估与片段分析
DNA片段回收电泳后目标DNA片段的切胶回收
分子克隆载体与插入片段的酶切鉴定与筛选
核酸疫苗/药物分析核酸药物及疫苗制品中DNA成分的鉴定与纯度分析

六、使用说明

操作步骤

  1. 将6×DNA上样缓冲液与DNA样品按1:5体积比混合(例如:5 μL DNA样品中加入1 μL 6×缓冲液)

  2. 用移液器轻轻吹打混匀,短暂离心收集液体至管底

  3. 将混合好的样品小心加入琼脂糖凝胶或PAGE凝胶的加样孔中

  4. 接通电源开始电泳,通过观察溴酚蓝和二甲苯青FF的迁移位置判断电泳进程

注意事项

  • 使用前请将6×DNA上样缓冲液充分融解并混匀

  • 配制好的1×工作液不宜长期保存,建议现用现配

  • 上样量不宜过多,以免超出凝胶加样孔容量导致样品溢出

  • 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用

七、注意事项

  • 本产品为6倍浓缩液,使用前需稀释至1×工作浓度

  • 本产品不含有甲醛等变性剂,不适用于变性RNA的电泳

  • 溴酚蓝和二甲苯青FF在紫外光下无荧光,不会干扰DNA的紫外检测

  • 为了您的安全和健康,操作时请穿实验服并佩戴一次性手套

  • 本产品仅限科研用途,不得用于临床诊断或治疗

八、储存条件与有效期

  • 短期保存:4℃可保存12个月

  • 长期保存:-20℃可长期保存

  • 运输条件:常温运输

  • 注意事项:若长期保存出现沉淀,可于室温放置或37℃水浴加热溶解并充分混匀后使用,不影响产品性能

九、订购信息

本产品现货供应,提供多种规格,支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具,以高品质上样缓冲液赋能核酸电泳分析的精准与高效。


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