RIPA裂解液

RIPA裂解液 | 强效组织细胞裂解液 | 总蛋白提取 | Western Blot专用 | 免疫沉淀IP裂解液

别名：RIPA缓冲液、放射免疫沉淀测定裂解液、Radio Immunoprecipitation Assay Lysis Buffer

一、产品概述

富沃克生物推出的RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer）是一款经典的强效细胞、组织快速裂解液。本产品采用Tris-HCl、NaCl、Triton X-100、脱氧胆酸钠及SDS科学配比，可高效裂解细胞膜、胞浆及胞核蛋白，裂解强度高，兼容性好。

RIPA的全称是放射免疫沉淀测定（Radio Immunoprecipitation Assay），最初是为该应用而开发，如今已成为提取总蛋白最常用的选择之一。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。本产品为强效型，裂解能力优于NP-40裂解液和中等强度的RIPA裂解液。

在蛋白研究中，细胞或组织的高效裂解是获取高质量蛋白样本的第一步，直接决定了后续Western Blot、免疫沉淀（IP）等实验的成败。本产品通过组合离子型去垢剂和非离子去污剂，可全面消化细胞膜、胞浆亚组分及核膜，高效释放总蛋白。以超纯水为基质，无菌灌装，开瓶即用，需冷藏保存，使用前需添加蛋白酶抑制剂。产品现货供应，欢迎分子生物学实验室及科研单位老师选购。

二、技术原理

RIPA裂解液由多种去垢剂和缓冲成分组成，通过物理和化学作用协同实现细胞的完全裂解。

多重去垢剂的协同裂解作用：

• 离子型去垢剂（SDS、脱氧胆酸钠）：这是RIPA裂解液作用强劲的核心。SDS和脱氧胆酸钠能高效破坏细胞膜和核膜。脱氧胆酸钠还能有效破坏蛋白质-蛋白质之间的相互作用。

• 非离子型去垢剂（Triton X-100或NP-40）：温和地溶解细胞膜，释放膜蛋白和胞浆蛋白。

三种去垢剂协同作用，确保了从细胞质到细胞核的全面裂解。

缓冲与保护系统：

• Tris-HCl缓冲体系：提供稳定的弱碱性pH环境（约pH 7.4），维持蛋白的天然构象。

• 高盐浓度（NaCl）：提供适宜的离子强度，有助于破坏蛋白质与DNA的相互作用，促进蛋白溶解。

无菌灌装与即用型设计：本产品以超纯水为基质，在洁净环境中无菌灌装，确保无微生物污染，开瓶即用。但需要特别注意的是，本产品不含蛋白酶抑制剂，为防止蛋白降解，用户在使用前必须自行添加。

三、核心优势

1. 强效裂解，蛋白得率高

裂解强度大，可高效提取细胞膜、胞浆和细胞核中的总蛋白。无需经过研磨、反复冻融、超声破碎等繁琐前处理，即可高效提取蛋白。所得蛋白样品质量高，可用于常规的PAGE、Western、免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP）和ELISA等实验。

2. 兼容性好，下游应用广泛

适用于Western Blot、免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP）和ELISA等多种下游实验。特别适用于免疫共沉淀检测蛋白质-蛋白质之间的相互作用。对大部分抗原表位的检测效果良好。

3. 经典配方，性能稳定

经典的RIPA配方，效果经过广泛验证。配方科学，能有效抑制蛋白降解。

4. 操作便捷，省时高效

提取过程简单方便，可将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。无需复杂的设备，配合常规离心机即可完成。

四、技术参数

五、主要应用场景

RIPA裂解液是蛋白研究的基础工具，适用于多种实验场景：

六、使用说明

为确保最佳的蛋白提取效果，请遵循以下标准操作流程。

1. 准备工作

• 融解与混匀：将RIPA裂解液从冰箱取出，融解并充分混匀。

• 添加抑制剂：在使用前数分钟内，根据实验需求加入蛋白酶抑制剂（如PMSF至终浓度1mM）。如需检测磷酸化蛋白，还需加入磷酸酶抑制剂。

2. 样本裂解

• 培养细胞样品：

• 贴壁细胞：去除培养液，用预冷的PBS洗涤。按比例（如6孔板每孔加入150-250μL）加入预冷的裂解液。

• 悬浮细胞：离心收集细胞，用预冷的PBS洗涤。按比例（如每0.5-5×10⁶细胞用1mL裂解液）加入裂解液。

• 组织样品：

• 将组织剪成细小的碎片。

• 按比例（如每100mg组织加入1mL裂解液）加入裂解液。

• 使用匀浆器在冰上匀浆，直至充分裂解。

3. 收集蛋白

• 冰上孵育：将裂解物置于冰上或4℃孵育5-15分钟，期间可多次吹打或震荡，以充分裂解。

• 离心：在4℃下，以12,000-14,000g离心5-15分钟。

• 收集上清：小心转移上清液至新管中，即为所得总蛋白样品。可直接用于后续实验或-80℃保存。

七、注意事项

• 冰上操作：裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

• 添加抑制剂：本品不含蛋白酶抑制剂，需用户自备并临用前加入。

• 避免反复冻融：为取得最佳效果，建议将裂解液适当分装后使用，避免反复冻融。

• SDS析出：裂解液中SDS在低温下易沉淀析出。使用前可37℃-60℃水浴加热溶解，恢复至室温后使用。

• 蛋白定量方法：由于含有较高浓度的去垢剂，不适合用Bradford法测定蛋白浓度。建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。

八、储存条件与有效期

• 保存条件：建议-20℃或4℃保存。

• 有效期：-20℃保存，有效期一年。

九、订购信息

本产品现货供应，无菌灌装，开瓶即用。提供多种规格以满足不同实验需求，支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具，以高品质RIPA裂解液赋能蛋白研究、免疫检测与分子互作分析的每一个环节。

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