探针法 Probe qPCR Mix MultiPlus 定量PCR试剂 科研试剂 FWKNE

探针法Probe qPCR Mix MultiPlus | 多重定量PCR预混液 | 通用型TaqMan探针法 | 2X即用型 | 科研试剂

别名：多重荧光定量PCR Mix、探针法qPCR预混液、MultiPlus qPCR Mix、TaqMan探针法qPCR预混液

一、产品概述

富沃克生物推出的探针法Probe qPCR Mix MultiPlus是一款专为多重荧光定量PCR检测设计的高性能即用型预混液。本产品采用热启动Taq酶与深度优化的缓冲体系，配合dUTP/UDG防污染系统，可有效消除PCR产物残留污染，具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优异性能。产品适用于单重及多重定量PCR检测，支持TaqMan、MGB等多种探针类型，可在一个反应孔中同时检测多个靶标基因。以超纯水配制，无菌无酶灌装，开瓶即用，用户只需自备引物、探针及模板即可快速建立反应体系。兼容主流qPCR仪器，提供ROX参考染料选配。产品-20℃保存，现货供应，欢迎分子生物学实验室及科研单位老师选购。

二、技术原理

5‘-核酸酶法（TaqMan探针法）检测原理：本产品基于TaqMan探针法的5‘-核酸酶活性检测原理。在PCR反应过程中，探针与模板特异性结合，Taq DNA聚合酶的5’→3‘外切酶活性将探针切割，使报告荧光基团与淬灭基团分离，从而产生可被实时检测的荧光信号。荧光信号的强度与PCR产物的累积量呈正相关，通过实时监测荧光信号即可实现对起始模板的准确定量。

热启动酶技术：本产品采用抗体法修饰的热启动Taq DNA聚合酶。在常温下，抗体与酶结合，封闭酶活性中心，有效抑制非特异性扩增和引物二聚体的形成。当PCR反应进入预变性阶段（通常95℃）时，抗体变性失活并释放DNA聚合酶，从而在高温下恢复酶活性，确保仅在目标温度下启动扩增反应。这一机制大大提高了PCR反应的特异性和检测灵敏度。

多重反应缓冲体系的深度优化：针对多重PCR反应的特点，本产品对缓冲体系进行了专门优化。优化的离子浓度和反应促进因子可确保多个引物-探针组合在同一反应管中高效、特异地扩增，不会相互干扰。显著提高反应的扩增效率和低浓度模板的有效检出率。

dUTP/UDG防污染系统：本产品引入了dUTP/UDG防污染系统，以dUTP替代dTTP。在PCR反应中，dUTP被掺入扩增产物中。若前次实验的扩增产物（含dUTP）污染了新的反应体系，UDG酶（尿嘧啶-DNA糖基化酶）可在室温下特异性识别并切除含dUTP的DNA链中的尿嘧啶碱基，使其无法作为PCR扩增模板。这一机制可有效消除气溶胶污染造成的假阳性结果，保证检测的准确性。

Tli RNaseH的辅助作用：本产品预混了耐热性RNaseH（Tli RNaseH）。当以cDNA为模板进行PCR反应时，Tli RNaseH可抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的抑制作用，进一步提高扩增效率。

三、核心优势

1. 支持多重检测，通量高：支持在同一反应孔中同时检测多个靶标基因。优化的多重反应缓冲体系确保各靶标扩增互不干扰。可同时检测多达4个或更多靶标。适用于基因分型和多重定量分析。

2. 高灵敏度与高特异性：抗体法热启动Taq酶有效抑制非特异性扩增。配合优化的PCR缓冲液，可在宽广的动态范围内实现高速、高特异性扩增。对低拷贝数模板具有良好的检测灵敏度。

3. dUTP/UDG防污染系统，有效防止假阳性：引入dUTP/UDG防污染系统，有效消除PCR产物残留污染。室温下即可发挥作用，降解含U的污染物。有效防止气溶胶污染造成的假阳性结果。

4. 2×即用型预混液，操作极简：本产品为2×浓度的预混液，包含除引物、探针和模板外的所有qPCR反应组分。使用时只需加入模板、引物和探针即可进行反应。可最大限度地减少人为误差，节约实验操作时间，降低污染几率。

5. 兼容主流qPCR仪器，ROX可选配：兼容ABI、Roche、Bio-Rad等主流品牌荧光定量PCR仪。提供ROX参考染料选配，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。可根据不同机型选择是否需要添加ROX及添加浓度。

6. 免冰盒配制，操作灵活：产品可以免冰盒配制反应体系，可直接于常温进行PCR Mix、引物、模板等组分的配制。配制好的PCR反应体系可常温放置24小时而保持扩增效率不变。

7. 稳定性好，批次间一致：优化的缓冲体系和稳定剂配方确保产品具有良好的稳定性。批次间一致性优异，保证实验数据的重复性和可靠性。

四、技术参数

五、ROX参比染料选择指南

不同荧光定量PCR仪对ROX的要求不同，请根据实际所用仪器选择合适版本：

六、主要应用场景

七、使用说明

反应体系配制（以20μL反应体系为例）：

参考扩增程序：

注意事项：

• 使用前将Probe qPCR Mix MultiPlus上下颠倒轻轻混合，避免起泡。不能使用振荡器混匀

• 如果试剂在保存过程中形成沉淀，轻轻用手握一会儿或室温短时间放置后，颠倒混匀至完全溶解

• 融解后的试剂请立即冰上放置

• 反应液的配制、分装请使用新的一次性枪头，避免样品间污染

• 如果样品和引物因混入核酸酶而被降解，则不能准确进行检测

• 建议在超净工作台内配制，使用无核酸酶残留的枪头和反应管

• 推荐使用带滤芯的枪头，避免交叉污染和气溶胶污染

八、储存条件与有效期

• 保存温度：-20℃保存

• 运输条件：≤0℃运输

• 有效期：12-24个月（自生产日期起）

九、订购信息

本产品现货供应，提供多种规格以满足不同实验需求。提供ROX参考染料选配，支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具，以高品质多重qPCR预混液赋能基因定量检测的精准与高效。

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