10×DNA上样缓冲液 10×Loading Buffer

10×DNA上样缓冲液（10×Loading Buffer）｜产品技术说明书.pdf

10×DNA上样缓冲液（10×Loading Buffer）
双染料指示型｜核酸电泳专用｜适配琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶｜即用型浓缩液

别名：DNA上样缓冲液、凝胶加样缓冲液、10倍浓缩DNA上样缓冲液、双色上样指示剂

一、产品概述

富沃克生物推出的10×DNA上样缓冲液（10×Loading Buffer）是一款专为核酸凝胶电泳设计的高品质样品预处理试剂。本产品采用溴酚蓝（Bromophenol Blue）与二甲苯青FF（Xylene Cyanol FF）双指示剂配方，含甘油及EDTA，是10倍浓缩的即用型溶液。使用时按DNA样品与缓冲液9:1比例稀释至1×工作浓度，稀释后比重仍较大，可确保加样时样品沉入凝胶加样孔底部。产品中的双染料可清晰指示电泳进程，EDTA可螯合Mg²⁺有效终止酶切反应，甘油确保样品在点样孔底部聚集。产品适用于常规双链DNA、单链DNA及RNA的非变性琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。以超纯水配制，-20℃保存两年有效，4℃保存一个月有效。现货供应，欢迎分子生物学实验室及科研单位老师选购。

二、技术原理

双指示剂染料系统：本产品含有溴酚蓝和二甲苯青FF两种示踪染料。在电泳过程中，两种染料会以不同的速率向阳极迁移，通过观察染料条带的位置即可实时判断核酸片段的迁移情况，方便适时终止电泳。

• 溴酚蓝：在0.5%~1.5%的琼脂糖凝胶中，其迁移速率与约300 bp的双链线性DNA分子相近

• 二甲苯青FF：在相同条件下，其迁移速率与约4 kb的双链线性DNA分子相近

两种染料的迁移速率比约为2.2:1，且该比例与琼脂糖浓度无关。这一双色指示系统使实验人员能够根据染料位置灵活判断电泳进程——当溴酚蓝迁移至凝胶适当位置时，可终止电泳以保留小片段；当需要观察大片段时，可参考二甲苯青的位置。

甘油增密与沉降功能：甘油是上样缓冲液的关键组分，其密度大于缓冲液，可显著增加样品的比重。稀释至1×后比重仍然较大，加样后样品能够顺利沉入凝胶加样孔底部，有效防止样品飘出点样孔。这一特性确保了样品在孔内聚集，获得清晰、集中的电泳条带。

EDTA的核酸保护与酶反应终止功能：EDTA能够螯合Mg²⁺、Ca²⁺等二价金属离子，具有双重保护作用。一方面可有效抑制金属离子依赖的DNase活性，保护DNA样品在电泳前不被降解；另一方面可在上样时迅速终止DNA样品中残留的限制性内切酶或其他金属离子依赖型酶的活性，防止酶切反应在电泳过程中继续进行，确保电泳结果反映真实的酶切产物状态。

三、核心优势

1. 双指示剂系统，电泳进程一目了然：溴酚蓝与二甲苯青FF双色指示剂可清晰指示电泳进程。两种染料迁移速率不同，可覆盖从300 bp到4 kb的宽范围DNA片段监测需求。实验人员可根据实验目的灵活选择终止电泳的时机——监测小片段时参考溴酚蓝，监测大片段时参考二甲苯青。

2. 高比重配方，确保样品沉入孔底：含甘油成分，稀释至1×后比重仍较大。加样后样品迅速沉入凝胶加样孔底部，有效防止样品飘出。尤其适合低浓度琼脂糖凝胶或需要长时间加样的操作场景。

3. EDTA双重保护，保障样品质量：EDTA螯合金属离子，有效抑制核酸酶活性，保护DNA样品不被降解。同时可终止残留酶活性，确保电泳结果准确反映样品状态。

4. 兼容多种电泳体系：适用于常规双链DNA、单链DNA及RNA的非变性琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。可用于PCR产物检测、质粒分析、酶切产物鉴定、基因组DNA检测等多种实验场景。

5. 10×浓缩液，使用灵活经济：10倍浓缩设计，使用时按9:1比例稀释即可。一瓶可配制大量1×工作液，经济实惠，储存占用空间小。

6. 超纯水配制，品质可靠：以超纯水为基质配制，不含核酸酶。确保DNA样品在上样和电泳过程中不被降解，保障实验结果的准确性。

四、技术参数

五、主要应用场景

六、使用说明

操作步骤：

1. 取适量DNA样品（如9 μL）置于离心管或PCR管中

2. 加入1/10体积的10×DNA上样缓冲液（如9 μL样品加入1 μL缓冲液）

3. 用移液器轻轻吹打混匀，短暂离心收集液体至管底

4. 将混合好的样品小心加入琼脂糖凝胶或PAGE凝胶的加样孔中

5. 接通电源开始电泳，通过观察溴酚蓝和二甲苯青FF的迁移位置判断电泳进程

注意事项：

• 使用前请将10×DNA上样缓冲液充分融解并混匀

• 配制好的1×工作液不宜长期保存，建议现用现配

• 上样量不宜过多，以免超出凝胶加样孔容量导致样品溢出

• 电泳过程中注意观察染料指示条带，避免目标DNA片段跑出凝胶

• 本产品适用于非变性电泳，如需变性电泳请选用含变性剂的上样缓冲液

七、储存条件与有效期

• 长期保存：-20℃保存，有效期2年

• 短期保存：4℃保存，有效期1个月

• 运输条件：常温运输（冰袋运输更佳）

• 注意事项：如出现沉淀，可于室温放置或37℃水浴加热溶解并充分混匀后使用，不影响产品性能

八、订购信息

本产品现货供应，提供多种规格（1mL、5mL、10mL等），支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具，以高品质上样缓冲液赋能核酸电泳分析的精准与高效。

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