三（羟甲基）氨基甲烷

三（羟甲基）氨基甲烷，通常简称为Tris，是生物化学和分子生物学实验中最核心的缓冲剂之一。它通常以白色结晶粉末的形式存在，因其在pH 7.0-9.0范围内具有出色的缓冲能力，被广泛用于配制多种实验缓冲液。其CAS号为77-86-1，分子式为C₄H₁₁NO₃，分子量121.14，有效缓冲范围为pH 7.0-9.0，25℃时pKa为8.1，常见纯度规格为≥99%或≥99.9%。

Tris的缓冲能力来源于其氨基的质子化与去质子化平衡。在25℃时Tris的pKa为8.08，在pH 7.0-9.2范围内具有优异的缓冲容量，恰好与大多数生物体和酶促反应的生理pH范围高度吻合。

Tris是TAE和TBE缓冲液的核心组分，用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳，Tris提供必要的离子强度并在凝胶电泳过程中保持pH稳定，这对于根据核酸的大小和电荷准确分离核酸至关重要。Tris-HCl与EDTA配合配制TE缓冲液，用于核酸的纯化和储存，Tris提供稳定的pH环境，EDTA螯合金属离子以保护核酸免受核酸酶降解。在蛋白质实验中，Tris是SDS-PAGE蛋白电泳缓冲液和蛋白提取裂解液的常用组分，分离胶缓冲液（1.5M Tris-HCl, pH 8.8）和浓缩胶缓冲液（0.5M Tris-HCl, pH 6.8）均以Tris为基础。在Western Blot实验中，Tris缓冲盐溶液（TBS）常用于膜的洗涤和抗体稀释。此外，Tris还广泛用于细胞培养液、免疫检测、酶反应体系及作为酸量滴定的基准物质。

Tris溶液的pH值受温度影响显著，温度每升高1℃，pH值约降低0.03个单位，因此务必在实验所需的温度条件下进行pH调节。若需在特定温度（如4℃或37℃）下使用，建议在该温度下校准pH计后进行调节。Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍pH值的变化可能大于0.1，配制时需确认最终工作浓度，不可将高浓度储备液的pH直接等同于稀释后的pH。Tris易吸收空气中的CO₂，配制的缓冲液需注意盖严密封，避免长时间暴露于空气中。Tris可能与某些金属离子（如Cr³⁺、Fe³⁺等）发生相互作用，对某些pH电极有干扰，需使用与Tris兼容的电极。吸入、摄入或皮肤吸收Tris可能造成伤害，操作时需戴好手套和护目镜。

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