Tris-HCl缓冲液

Tris-HCl缓冲液是分子生物学和生物化学实验中最常用的缓冲体系之一，广泛应用于核酸电泳、蛋白质分析、DNA保存等实验场景。Tris（三羟甲基氨基甲烷）为弱碱，其水溶液pH在10.5左右，通过加入盐酸调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液。

Tris-HCl缓冲液的有效缓冲范围在pH 7.0-9.2之间，常用pH规格包括6.8、7.4、8.0、8.8等。Tris在25℃时的pKa为8.1，分子式C₄H₁₁NO₃，分子量121.14。

关键特性：

• 温度敏感性：Tris溶液的pH值随温度变化显著——温度每升高1℃，pH值约下降0.03个单位。因此，配制时必须待溶液冷却至室温后再调节pH值，否则使用温度下pH会偏离预期。

• 浓度效应：Tris缓冲液稀释后pH会发生变化，不可将高浓度储备液的pH直接等同于工作液pH。

Tris-HCl在核酸电泳中作为TAE和TBE电泳缓冲液的核心组分，在蛋白质电泳中1.5M Tris-HCl（pH 8.8）用于分离胶，0.5M Tris-HCl（pH 6.8）用于浓缩胶，并与EDTA配制成TE缓冲液用于DNA的储存，Tris缓冲盐水（TBS）用于Western Blot中膜的洗涤和抗体稀释。

以配制1M Tris-HCl（pH 8.0，1L）为例：称取121.1g Tris碱溶于约800mL去离子水中，搅拌至完全溶解，用浓盐酸缓慢调节pH至目标值（pH 8.0约需42mL浓HCl，pH 7.4约需70mL，pH 7.6约需60mL），定容至1L，高压灭菌（121℃，15分钟），室温保存。务必等溶液冷却至室温后再调pH，否则温度变化会导致pH偏离预期值。高浓度储存液低温保存可能会有结晶析出，可加热助溶，待溶解完全后再行稀释使用。

自行配制Tris-HCl缓冲液需经称量、调pH、灭菌等多步操作，且pH准确性高度依赖温度控制。杭州富沃克生物科技有限公司提供多种规格的即用型Tris-HCl缓冲液，覆盖pH 6.8、7.4、8.0、8.8等常用规格，经0.22μm过滤除菌，无DNase/RNase污染，开瓶即用，批次稳定。

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