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0.1M Tris-HCl缓冲液是分子生物学和生物化学实验中使用频率最高的缓冲液之一,广泛应用于核酸电泳、蛋白纯化、酶促反应、免疫检测及样品制备等各类实验场景。Tris-HCl缓冲液由三羟甲基氨基甲烷与盐酸配制而成,Tris在25℃下的pKa为8.1,有效缓冲范围为pH 7.0~9.2。0.1M是最常用的工作浓度,既能提供充足的缓冲容量,又不会因离子强度过高而干扰生物大分子的结构与活性。
本品选用高纯度Tris碱为原料,以超纯水为溶剂精准配制,经0.22μm无菌过滤处理,溶液澄澈透明,无DNase/RNase污染。不同pH规格可适配不同实验需求——pH 7.0适用于细胞裂解液制备和免疫共沉淀,pH 7.4适用于蛋白纯化和Western blot,pH 8.0适用于核酸溶解与保存,pH 8.8适用于SDS-PAGE分离胶缓冲液。保存条件为室温或2-8℃(视产品而定),保质期为1年。
Tris-HCl的pH值具有显著的温度依赖性,温度每升高1℃,pH值下降约0.03个单位。在4℃配好的pH 8.0缓冲液,在25℃使用时实际pH约7.8,因此建议在实验所用的温度下校准pH计并调节pH。市售即用型产品已在25℃下精准标定pH值,用户可直接使用。在核酸电泳与提取中,Tris-HCl是TAE、TBE等电泳缓冲液的核心成分,也是TE缓冲液的基础组分,用于核酸的溶解与长期保存。在蛋白电泳与纯化中,SDS-PAGE的分离胶缓冲液(1.5M Tris-HCl,pH 8.8)、浓缩胶缓冲液(0.5M Tris-HCl,pH 6.8)及电泳缓冲液均依赖Tris-HCl体系。在酶促反应与免疫检测中,为限制性内切酶酶切、PCR扩增、ELISA等实验提供稳定的反应环境。
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