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蛋白分离的 “第一道闸门”:SDS-PAGE 5% 浓缩胶精准配制指南

发布时间:2026-01-30      点击次数:20

在 SDS-PAGE 电泳实验中,5% 浓缩胶是实现蛋白样品高效分离的 “第一道闸门”。它通过 pH 梯度与凝胶孔径的协同作用,将复杂的蛋白样品浓缩成一条窄带,为后续分离胶的精准分离奠定基础。浓缩胶的配制质量直接决定了样品浓缩效果与最终条带的清晰度,其组分比例、配制流程及细节把控都至关重要。本文将结合精准配方表,系统解析 5% 浓缩胶的原理、配制要点与实验应用,助力实验人员高效掌握这一核心技术。


SDS-PAGE 5%的精准配方表与组分解析如下:

5% 浓缩胶配方表.pdf


5%浓缩胶作为 SDS-PAGE 电泳的 “第一道闸门”,其精准配制是实验成功的关键。通过掌握配方原理、严格把控配制流程、关注细节优化,实验人员可获得理想的样品浓缩效果,为后续分离胶的精准分离奠定坚实基础。在实际操作中,需结合实验场景灵活调整参数,并做好试剂与器具的质控,以确保实验结果的稳定性与可靠性。


实验场景中的优化与注意事项:


常见问题与解决方案:

  • 1、凝胶聚合过慢:APS 或 TEMED 失效,需更换新鲜试剂;环境温度过低,可置于 37℃孵育加速聚合。

  • 2、凝胶聚合不均:试剂混合不充分,需确保搅拌均匀;胶板密封不严导致漏液,需检查胶板贴合度。

  • 3、样品浓缩效果差:浓缩胶 pH 偏离 6.8,需重新配制 Tris-HCl 缓冲液;SDS 浓度不足,需核对添加量。



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