DNA溶在水里不放心？这份TE缓冲液配方请收好

提完DNA的你，是不是随手就用ddH₂O溶了？第二天跑胶一看，条带模糊了、降解了，甚至直接消失了。问题出在哪？纯水缺乏pH缓冲和金属离子螯合保护，且难以保证绝对无核酸酶污染——你辛辛苦苦提的样品，正在水里慢慢受损。那有没有一种简单、稳定、安全的保存方案？

一、TE缓冲液是什么？

TE缓冲液（Tris-EDTA buffer）是分子生物学中最基础的“守护神”。“TE”这个名字来源于它的两大核心组分：Tris（pH缓冲剂）和EDTA（金属离子螯合剂）。它的核心作用就一句话：溶解DNA/RNA，同时保护其不被降解。

Tris提供弱碱性环境（pH 8.0），维持DNA的结构稳定；EDTA则像“清道夫”一样螯合掉溶液中的Mg²⁺等二价金属离子——这些离子正是核酸酶发挥活性必需的“燃料”，被EDTA“没收”后核酸酶就失去了活性。标准1×TE缓冲液组成为：10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0。

二、TE缓冲液配方成分及配制用量（1×标准版）

下表整理了TE缓冲液的配方成分及作用[1]：

配比仅供参考，可根据实验需求调整浓度（如10×TE浓缩液等）。

三、TE缓冲液配制全流程（母液→终液→灭菌→分装）

 准备工作：先配制两种母液——1 M Tris-HCl（pH 8.0）和0.5 M EDTA（pH 8.0）。

1. 1M Tris-HCl（pH 8.0）配制（100 mL） ：在通风橱内，称取12.12 g Tris碱，溶于约80 mL纯化水中，冷却至室温，用浓HCl（约12M）逐滴加入，边加边搅拌，用pH计监测pH至8.0，定容至100 mL。

2. 0.5M EDTA（pH 8.0）配制（100 mL） ：称取18.61 g EDTA-Na₂·2H₂O，溶于约80 mL纯化水中。注意：EDTA二钠盐在pH接近8.0时才完全溶解，需用10M NaOH溶液逐滴加入，边加边剧烈搅拌，直至pH达到8.0（溶液澄清透明）。完全溶解后定容至100 mL。

1×TE缓冲液配制（以1 L为例） ：

1. 量取10 mL 1 M Tris-HCl（pH 8.0） ，加入约800 mL纯化水中。

2. 量取2 mL 0.5 M EDTA（pH 8.0） ，加入上述溶液中。

3. 充分混匀后用纯化水定容至1 L。

4. 可选择高温高压灭菌（121℃，15-20分钟）。灭菌后待冷却至室温，建议用pH计重新校核pH，如有偏离可调回8.0。

5. 分装后室温或4℃保存。建议分装出工作分装液，避免反复从储存瓶中取用。

⚠️ 关键提醒：

1. 配制EDTA时pH必须调到8.0才会完全溶解，否则EDTA粉末一直悬在那里就是不化。

2. Tris-HCl和EDTA的母液都必须是pH 8.0，否则混合后终浓度pH会偏离目标。

3. 建议高温高压灭菌，彻底灭活核酸酶（灭菌后需重新校准pH）。

4. 短期使用的DNA可4℃保存，长期保存建议-20℃或-80℃。

5. 避免反复冻融，反复冻融产生的冰晶会物理损伤DNA。

6. TE中的EDTA会螯合Mg²⁺，直接用于酶切/PCR等需要二价金属离子的反应前务必注意——可能需要稀释或透析去除EDTA。

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参考文献

[1] Sambrook J, Russell DW. Molecular Cloning: A Laboratory Manual[M]. 3rd ed.Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001.

[2] TE缓冲液[EB/OL]. 维基百科, (2013-09-25). https://zh.wikipedia.org/zh-sg/TE缓冲液

[3] TE缓冲液配制及作用[EB/OL]. Thermo Fisher Scientific.https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/rna-extraction/te-buffer.html

[4] TE缓冲液[EB/OL]. 百度百科, (2026-02-07). https://baike.baidu.com/item/TE缓冲液/5846711