Solution II – 质粒提取碱裂解液（500ml 配制）

Solution II – 质粒提取碱裂解液（500ml 配制）

用途说明
用于质粒DNA提取中细菌细胞壁和细胞膜的裂解，使质粒DNA释放至溶液中，是碱裂解法中的核心裂解步骤。

工作液组分浓度

• 200 mM NaOH

• 1%（W/V）SDS

配制方法（500ml 体系）

1. 量取 50 ml 10% SDS、50 ml 2N NaOH，置于 500 ml 烧杯中。

2. 加入灭菌水定容至 500 ml，轻轻颠倒混匀（避免剧烈搅拌）。

3. 室温放置，备用。建议现用现配。

关键操作要点

• 空气中的 CO₂ 会迅速与 NaOH 反应生成碳酸钠，导致 pH 值下降，裂解效率降低，因此最好现用现配，不宜长期存放。

• SDS 为阴离子去污剂，易产生气泡，配制及混匀时请勿剧烈搅拌，以免气泡过多影响后续裂解效果。

• 本溶液无需高温高压灭菌，使用前确保溶液澄清、无沉淀析出。