苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）– 核酸抽提混合液

苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）– 核酸抽提混合液

用途说明
用于DNA/RNA抽提中去除蛋白质，是分子生物学核酸纯化实验中最经典的有机抽提试剂组合。

各组分作用

• 苯酚：使蛋白质变性沉淀，是去除蛋白质的主要活性成分。

• 氯仿：加速蛋白质变性，并有助于有机相与水相的清晰分离，同时可去除残留在水相中的苯酚。

• 异戊醇：作为消泡剂，减少抽提过程中因剧烈混匀产生的气泡，便于分层操作。

配制方法

1. 取Tris-HCl平衡苯酚（pH ≥ 7.8），与等体积的氯仿/异戊醇（24:1）混合液混合均匀。

2. 转移至棕色玻璃瓶中，4℃避光密封保存。

关键操作要点

• 剧毒强腐蚀性，安全第一：苯酚、氯仿均为剧毒、强腐蚀性化学品，严禁在通风橱外操作，全程须佩戴手套、防护眼镜和实验服。

• 皮肤接触紧急处理：若溶液不慎溅到皮肤上，应立即用大量清水长时间冲洗，然后用肥皂和水洗涤，切不可用乙醇（乙醇会加速苯酚经皮肤渗透吸收，加重损伤）。

• 长期保存注意：上覆水相须保留（起隔绝空气、防止氧化的作用），若水相变黄或有机相变为粉红/棕色，提示已氧化，应弃用重新配制。

• 使用时应根据样本量按需取用，取用后及时盖紧瓶盖，减少挥发和氧化。