抗凝总失败？RNA提取翻车？柠檬酸钠溶液到底怎么配才靠谱？

做血液抗凝的同学都懂——采完血放一会儿就凝固了，RNA提取时降解得一塌糊涂，明明加了抗凝剂却跟没加一样。你换了采血管、调了比例、检查了操作，最后发现是柠檬酸钠溶液本身配错了。柠檬酸钠溶液是分子生物学和细胞生物学中最常用的储备液之一——血液抗凝、RNA提取、缓冲试剂配制，处处都有它的身影。浓度不对、pH不准，实验直接报废。那0.75M柠檬酸钠溶液到底是什么？怎么配才靠谱？

一、柠檬酸钠溶液是什么？

柠檬酸钠（Sodium Citrate），又称枸橼酸钠，化学式为C₆H₅Na₃O₇，分子量258.07（无水物）【2】。实验室常用的形式是二水合柠檬酸钠（Na₃C₆H₅O₇·2H₂O），分子量294.10【5】。0.75M柠檬酸钠溶液就是以柠檬酸钠为溶质、纯水为溶剂配制的0.75 mol/L储备液，在分子生物学和细胞生物学试验中常用作血液抗凝剂和缓冲试剂【1】【2】。

核心作用【1】【4】：

1. 血液抗凝：柠檬酸根离子与血液中的钙离子结合形成可溶性螯合物，阻断凝血级联反应【1】

2. RNA提取：在异硫氰酸胍法中作为变性液的缓冲组分

3. 缓冲试剂：与其他试剂配合维持体系pH稳定

二、配方成分与表格【2】【3】【4】

配比仅供参考，不同纯度级别有差异，配制后需用pH计校准（如需特定pH）。

三、配制步骤（以配制100 mL 0.75M柠檬酸钠溶液为例）【1】【2】

1. 计算称量：称取22.05 g二水合柠檬酸钠（Na₃C₆H₅O₇·2H₂O，分子量294.10）【5】。如使用无水柠檬酸钠（分子量258.07）【2】，需按比例调整称量。称量前确认试剂无吸潮结块。

2. 溶解：加入约80 mL去离子水（用于RNA实验时建议使用DEPC处理水），搅拌至完全溶解（溶液应清澈透明）。

3. 定容：加去离子水定容至100 mL，充分混匀。建议在室温（20-25℃）下定容，以保证浓度的准确性。

4. 调pH（可选） ：如需特定pH（如pH 5.5【3】或pH 7.0【2】【4】），边搅拌边逐滴加入1 mol/L HCl或NaOH，每次加入后充分混匀，用pH计监测至目标值。

5. 过滤除菌（可选） ：如需无菌，可用0.22 μm滤膜过滤除菌。推荐使用过滤除菌，不建议高压灭菌（高压灭菌可能导致水分蒸发和pH偏移）【2】。

6. 分装保存：分装至无菌离心管中，4℃保存，一年有效【2】。

关键提醒【1】【2】【5】：

l 注意区分无水物和二水合物——无水柠檬酸钠分子量258.07【2】，二水合柠檬酸钠分子量294.10【5】，两者称量不同，不可混用。

l 二水合柠檬酸钠易风化——长期暴露在空气中会失去结晶水，称量前确认试剂状态，如有结块建议干燥后使用【5】。

l 溶液配制后应尽快使用或分装——长期存放可能因微生物污染而变质【2】。

l 4℃保存，避免反复冻融和阳光直射【2】。

l 作为血液抗凝剂使用时，通常与血液按1:9（V:V） 比例混合【1】。

四、商业化便捷选择——杭州富沃克生物

自己配制柠檬酸钠溶液虽然步骤清晰，但柠檬酸钠的精确称量（注意区分无水盐和结晶水盐）、pH的精准校准、无菌过滤的规范操作——每一步都影响实验结果的可靠性。如果追求省心省力，可以直接选择成熟的商业化产品。

杭州富沃克生物科技有限公司推出的0.75M柠檬酸钠溶液（pH 7.0） ，采用高纯度柠檬酸钠原料精准配制，浓度准确、pH精确校准、无菌过滤，即开即用，省去自行配制的繁琐与批次波动风险。适用于血液抗凝、RNA提取、缓冲试剂配制等多种分子生物学和细胞生物学实验场景。

杭州富沃克生物科技有限公司

邮箱：support@fwkbio.com

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官网链接：科研无菌柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液 实验室 pH 稳定缓冲试剂-杭州富沃克生物科技有限公司

参考文献

[1] 0.75mol柠檬酸钠怎么配制[EB/OL]. 搜狗问问, 2015-12-07. https://wenwen.sogou.com/z/q797007875.htm（配方计算参考）

[2] 碧云天. 0.75M 柠檬酸钠,pH7.0（ST368）产品说明[EB/OL]. https://m.beyotime.com/product/ST368.htm

[3] 上海源叶生物科技有限公司. 柠檬酸钠缓冲液（0.75mol/L, pH5.5）（R27931）产品说明[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2025-10-29. https://www.biomart.cn/infosupply/117381041.htm

[4] 上海源叶生物科技有限公司. 柠檬酸钠缓冲液（0.75mol/L, pH7.0）（R29846）产品说明[EB/OL]. 生物谷（BioMart）, 2025-10-29. https://www.biomart.cn/infosupply/117423081.htm

[5] 二水合柠檬酸钠[EB/OL]. 百度百科, 2025-09-11. https://baike.baidu.com/item/二水合柠檬酸钠