RNA提取纯度总翻车？试试8M LiCl二次沉淀，把DNA和蛋白“筛”出去

实验室里最让人崩溃的瞬间之一：RNA提取实验做到最后一步，沉淀效果不理想，纯度一塌糊涂，前面的辛苦全白费了。这时你可能会听到师兄师姐说：“试试用8M LiCl再纯化一次。 ”

没错，8M氯化锂溶液——分子生物学实验室里低调但靠谱的“RNA精纯利器”。今天咱们把它彻底讲透，配方也给你安排得明明白白。

一、8M LiCl到底是什么？

简单说，8M LiCl就是浓度为8 mol/L的氯化锂水溶液。氯化锂分子式LiCl，分子量42.39，CAS号7447-41-8【1】。

它在实验室里最核心的用途是选择性沉淀RNA——在高浓度锂离子作用下，RNA会沉淀下来，而DNA、蛋白质和游离核苷酸基本留在上清。这就像用筛子筛面粉——RNA被筛出来了，杂质留在上面。

重要补充：① 该法对大分子RNA（如rRNA、mRNA） 沉淀效率较高，而小分子RNA（如tRNA、5S rRNA）在4M LiCl浓度下主要保留在上清中；当LiCl浓度升至8M时，小分子RNA可部分共沉淀【6】。如果你的实验目标是回收所有RNA（包括小RNA），需谨慎评估此法是否适用。 ② 初次沉淀仍建议使用异丙醇或乙醇（快速、广谱），8M LiCl更适合在初次沉淀后对RNA进行“精纯化”——去除残留的DNA和蛋白质。

此外，8M LiCl还常用于制备染色质免疫沉淀（ChIP）的洗涤缓冲液【3】、RIPA洗涤缓冲液等。

二、配方成分一览表

配制8M LiCl溶液，核心就两样东西，但化学纯度与生物学活性需分开把控：

关键提醒：用于RNA实验的LiCl溶液必须不含DNA酶和RNA酶（即DNase/RNase free）【1】【2】。否则你沉淀下来的RNA可能已被悄然降解——实验等于白做。

三、配制步骤（手把手教学）

Step 1：计算称量

8M LiCl意味着每升溶液含8摩尔氯化锂。氯化锂分子量42.39 g/mol，所以需称取：

8 × 42.39 = 339.12 g（约339克氯化锂/升）

⚠️ 注意：氯化锂在20°C时的溶解度为832 g/L【5】，339 g/L完全可溶。

Step 2：溶解与定容（关键细节）

先取约 800 mL DEPC处理水 于烧杯中（磁力搅拌器开启）。【4】

缓慢分批加入LiCl固体——该溶解过程强烈放热，溶液温度会明显升高。必须待溶液完全冷却至室温后，再加水定容至1L，否则热胀冷缩会导致定容体积不准，浓度偏高。

Step 3：除菌处理

推荐方式：使用 0.22 μm滤膜过滤除菌，这是最安全、最稳定的方法【2】。

❌ 不优先推荐实验室自行高温高压灭菌，因为：① 高压下水分蒸发导致浓度漂移；② 玻璃瓶可能析出杂质；③ 无法精确控温；④ LiCl具吸湿性，高压灭菌后若密封不严，冷却过程中可能吸入空气中水分，进一步影响浓度。若实验室规程强制要求高压灭菌，须使用聚丙烯（PP）耐压瓶并严格密封，灭菌后冷却至室温并充分混匀——但此操作存在浓度变化风险，不推荐常规使用。

Step 4：分装与质控

按单次实验用量分装（如50 mL或100 mL/瓶），避免反复取用引入污染。

配制完成后，用pH计检测并记录溶液的pH值（通常在5~7之间），作为批次质控记录，便于后续问题追溯。保存条件：4°C保存，一年内有效【1】。操作时戴手套、穿实验服，注意无菌。

四、不想自己配？直接买现成的

自己配溶液，称量、溶解、过滤、测pH……一套下来半天没了。更怕的是——明明每一步都按要求做，最后跑胶还是翻车。问题可能出在试剂纯度、水质，或操作中引入了核酸酶。

直接购买商品化即用型产品是更省心、更可靠的选择。

杭州富沃克生物科技有限公司聚焦DNA/RNA提取纯化试剂盒及实验方案解决，依托自主搭建的核心技术平台进行产品开发。公司提供包括硫酸亚铁标准溶液、饱和氯化镁溶液、NaAc-HAc缓冲液、BSA牛血清白蛋白溶液等实验室常用化学试剂。8M LiCl溶液（DNase/RNase free） 为其常规现货产品线之一，采用分子生物学级LiCl、DEPC处理超纯水配制，经0.22 μm滤膜过滤除菌，每批次提供COA（质检报告），确保DNase/RNase活性低于检出限。具体货号及规格请咨询当地销售或访问富沃克生物官网查询，支持小规格试用装采购。

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五、参考文献

【1】碧云天生物技术. 8M LiCl (DNase/RNase free)(氯化锂溶液)(ST498-100ml). 氯化锂分子式LiCl，分子量42.39，CAS 7447-41-8；主要由氯化锂、DEPC处理水组成，不含DNA酶和RNA酶，经高压湿热灭菌处理，4°C保存一年有效.

【2】Sigma-Aldrich. Lithium chloride solution, 8 M, for molecular biology, ≥99% (L7026). 产品等级为分子生物学级，含量≥99%，浓度8M，DNase、RNase、protease均未检出，以18兆欧超纯水配制并经0.2 μm滤膜过滤.

【3】MedChemExpress. Lithium chloride, for molecular biology, 99% (HY-Y0649D). 分子式LiCl，分子量42.39，CAS 7447-41-8，可用于制备染色质免疫沉淀（ChIP）用洗涤缓冲液.

【4】广州美基生物科技有限公司. 8M LiCl产品说明. 即用型试剂，经滤膜精滤和灭菌，无DNase/RNase活性；用超纯水配制后加入DEPC处理，分装后高温高压灭菌.

【5】氯化锂溶解度数据. 20°C下水溶性为832 g/L.

【6】Sambrook J, Russell DW. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001.（LiCl选择性沉淀RNA的原理及对不同大小RNA的沉淀差异）