跑完胶一看，Marker条带跟蚯蚓爬似的——你的“分子尺子”可能没选对

跑完胶一看，Marker条带跟蚯蚓爬似的——你的“分子尺子”可能没选对

别焦虑。今天这篇把DNA Marker那点事儿掰开揉碎讲清楚。看完你至少能回答三个问题：它到底是什么？配方里有什么？怎么选、怎么用不翻车？

01 先来个比喻：它就是核酸电泳的“分子尺子”

DNA Marker说白了就是一把已知刻度的尺子。

这把“尺子”的“刻度”就是一系列已知长度的DNA片段【7】——100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、2000 bp……【1】【2】

制备方式主要有三种【7】：

1. 载体酶切法：用限制性内切酶切割已知序列的质粒或λDNA，得到一系列固定大小的片段【7】

2. PCR扩增法：设计多对引物，PCR扩增出不同长度的目标片段

3. 化学合成法：适用于特定片段的人工合成

02 核心成分大起底

市面上的DNA Marker配方大同小异，核心成分就这几样（数据来源于多家品牌产品说明书【1】【2】【3】【4】【5】【6】【8】）：

补充说明：不同品牌的配方存在细微差异——有的用溴酚蓝，有的用二甲苯青FF，有的两者都用，部分产品还使用橙黄G【6】。pH值从7.6到8.0不等【1】【2】。这些都是正常的产品差异，不影响核心功能。

03 怎么用？记住三个关键点

① 上样量：一般每孔加3~5 μL即可【4】【5】，具体按每1 mm加样孔宽度加1 μL计算【1】。加多了条带过曝变胖，加少了看不清。

② 凝胶浓度：推荐1.0%~2.5%琼脂糖凝胶——片段越小（如100~600 bp），需要凝胶浓度越高（2.0%~2.5%）【8】；片段越大（如500~7000 bp），用较低浓度（1.0%）即可【7】。

③ 电泳条件：电压4~10 V/cm（指凝胶长度，单位厘米），时间20~30分钟（在凝胶长度5~7 cm条件下）【2】。跑太快条带会歪，跑太慢浪费时间。

重要提醒【1】【2】【4】：

1. 无需加热——直接化冻混匀即可上样

2. 及时更换电泳缓冲液——老化的缓冲液离子浓度降低、pH上升，缓冲能力减弱，条带会模糊

3. -20°C长期保存，建议分装保存，避免频繁反复冻融

04 避坑清单

坑① 用了过期的电泳缓冲液 ❌ → 缓冲能力下降，条带跑得歪歪扭扭。

坑② Marker反复冻融 ❌ → DNA可能降解，条带变淡甚至消失。建议分装后-20°C保存【2】。

坑③ 上样量过大 ❌ → 条带过曝、变胖，无法准确判断大小【1】。

坑④ 凝胶浓度选错 ❌ → 小片段用低浓度胶会跑得太快、条带模糊；大片段用高浓度胶跑不动【7】【8】。

05 省事方案

杭州富沃克生物科技有限公司提供多款DNA Marker成品——即开即用，条带清晰【9】【10】：

产品咨询：19850855600
邮箱：support@fwkbio.com

官网链接：高清晰低拖尾 DNA Marker 即用型分子量标尺，条带锐利亮度均衡，适配 PCR 酶切核酸电泳科研实验耗材-杭州富沃克生物科技有限公司

参考文献

[1] Yingxinbio. DL2000 DNA Marker产品说明.

[2] Qiyunbio. DL 2000 DNA marker产品说明.

[3] BioWORLD. DNA Marker (100bp-1kb) Product Information.

[4] Biomart. 100bp DNA Marker产品介绍. 2023.

[5] Biomart. DNA分子量标准Marker (100~5000 bp)产品介绍. 2025.

[6] Biomart. DNA Marker（50~1500bp）产品说明.

[7] 百度百科. DNA分子质量标准物.

[8] 生工. DNA分子量标准Marker B（100~600 bp）产品说明.

[9] 杭州富沃克生物科技有限公司. 三色预染DNA Marker产品介绍（DNA606）.

[10] 杭州富沃克生物科技有限公司. 高清晰低拖尾DNA Marker产品介绍.