今天这篇把MES缓冲液那点事儿掰开揉碎讲清楚。看完你至少知道:它是什么?怎么配才不翻车?用在哪儿最合适?
MES全称2-(N-吗啉)乙磺酸【3】。1966年,Norman Good团队开发了一系列生物实验专用缓冲剂【1】,MES就是其中之一。
MES是两性离子缓冲剂【1】——分子内同时带正负电荷,但净电荷为零。缓冲能力来自磺酸基团(pKa≈6.1),两性离子结构使其不易穿透生物膜,对细胞和蛋白干扰极小【1】【6】。
看家本领是弱酸性缓冲【5】:有效范围pH 5.5~6.7,25°C下pKa=6.10(20°C时约6.15)。超出此范围,缓冲能力断崖下跌。Tris和PBS在弱酸性环境下根本hold不住,MES正好补上【3】【5】。
参数 | 数值 |
全名 | 2-(N-吗啉)乙磺酸【3】 |
分子式(无水) | C₆H₁₃NO₄S |
分子量(无水) | 195.24 g/mol |
分子量(一水合物) | 213.25 g/mol【2】 |
CAS(无水) | 4432-31-9【3】 |
25°C pKa | 6.10【1】 |
有效缓冲范围 | pH 5.5~6.7【1】 |
ΔpKa/ΔT | -0.011/°C【1】 |
注意:买时看清无水物(MW 195.24) vs 一水合物(MW 213.25) ——分子量不同,称错浓度全偏。
成分 | 作用 | 常见浓度 |
MES游离酸 | 主缓冲成分【4】 | 0.05~0.5 M【4】 |
NaOH/KOH | 滴定调pH(游离酸必须加)【4】 | 1 M、10 N【4】 |
MES钠盐 | 与游离酸混合配pH(替代法)【6】 | 等摩尔浓度 |
两种配制方法:①游离酸+NaOH滴定【4】;②游离酸+MES钠盐混合【4】。选一种即可。
①称量:称97.6g MES游离酸(无水物) 【4】。若用一水合物:97.6g × (213.25/195.24) ≈ 106.6g。
②溶解:800 mL去离子水,磁力搅拌至完全溶解【4】。起始pH约2.5~4.0(因批次而异)。
③调pH:用1M或10N NaOH逐滴加入【5】,pH计监测【4】。MES的pKa随温度变化,建议在目标实验温度下校准pH。调至pH 6.0,约需13.6 mL 10N NaOH【4】。
④定容:加水定容至1 L【4】。
⑤过滤:0.22 μm滤膜过滤除菌【7】。不要高压灭菌——MES高温灭菌会变黄(虽pH无明显变化),分解产物未知【6】,可能干扰实验【6】。
保存:2-8°C约3个月【6】;-20°C冻存可延至1年【6】。浑浊或沉淀→废弃。
①用MES配pH 7.4 ❌ → 超出有效范围【5】,请用HEPES或Tris【6】。
②不看分子量直接称 ❌ → 无水物vs一水合物,分子量不同。
③高压灭菌MES ❌ → 变黄、分解【6】。必须0.22μm过滤【7】。
④用MES跑Tris-甘氨酸胶 ❌ → MES-SDS专为Bis-Tris预制胶设计【7】,不可混用【7】。
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[1] Sigma-Aldrich. MES monohydrate Product Information Sheet.
[2] Sigma-Aldrich. MES hydrate Product Information (M2933/M5287/M8250).
[3] Santa Cruz Biotechnology. MES | CAS 4432-31-9.
[4] AAT Bioquest. MES (0.5 M, pH 6) Preparation and Recipe.
[5] Bioss. MES缓冲液的配置. 2025.
[6] 杭州富沃克生物科技有限公司. Good氏缓冲MES缓冲液全品类产品详解. 2026.
[7] 富沃克生物科技(深圳). 小分子蛋白电泳专用MES-SDS缓冲液产品说明. 2026.
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