一套琼脂糖凝胶电泳实验,看起来简单,背后却要凑齐四五种试剂耗材:琼脂糖、电泳缓冲液、核酸染料、Loading Buffer、DNA Marker……少一样都玩不转。
其实,你不需要一样一样去凑。 一套设计合理的试剂盒,把这些东西全部打包好了。
简单来说,它就是一套专为核酸电泳实验设计的“一站式解决方案”【1】。
试剂盒依据琼脂糖凝胶电泳实验原理,把电泳所需的核心试剂全部配好、分装好【1】。你拿到手,不用再四处采购各种试剂——开盒即用【1】。
学生要做的,就是制胶→上样→电泳→观察,亲手把DNA片段“跑”出来,再亲眼看到条带在凝胶上现身【1】。
以一个典型的教学用试剂盒为例,内容物通常包括以下组分【1】:
组分 | 规格(示例) | 作用 | 关键提醒 |
琼脂糖 | 4×0.25 g | 形成凝胶介质,按分子量大小筛分DNA片段 | 1包配25~30 mL缓冲液,凝胶浓度约0.8%~1.0%,适合小型电泳槽分离300~1000 bp片段 |
50×电泳缓冲液 | 20 mL | 提供导电离子,维持电场中稳定的pH环境 | 使用前稀释50倍至1×工作液 |
核酸荧光染料 | 80 μL | 与DNA结合后在光照下发光,让DNA“现形” | 不同染料对应不同成像仪:EB/GelRed需紫外光,GelGreen/SYBR可用蓝光 |
6×Loading Buffer | 80 μL | 增加样品密度,让样品沉入点样孔;含指示剂可追踪电泳进度 | 与样品按1:5比例混合(如4 μL LB + 20 μL样品) |
说明:上表规格来自参考文献[1]记载的新课标试剂盒产品,实际产品组分与规格可能因品牌不同而有差异,请以具体产品说明书为准。
操作流程非常直观,但每一步都有值得注意的关键点:
第一步:制胶——取1包琼脂糖(0.25 g),加入25~30 mL 1×电泳缓冲液中,微波加热至完全熔化。冷却至约60°C(手背触碰烧杯壁不烫为宜),加入核酸荧光染料(按说明书比例),摇匀后倒入制胶模具,插上梳子,静置约20~30分钟至凝胶完全凝固【1】。
⚠️ 关键:染料必须在凝胶冷却至约60°C时加入,温度过高可能导致染料分解失效。1包琼脂糖(0.25 g)配25~30 mL缓冲液,浓度约0.8%~1.0%,适合分离300~1000 bp的DNA片段。
第二步:上样——取20 μL DNA样品,加入4 μL 6×Loading Buffer(5:1比例),混匀后短暂离心(2000 rpm,1~2分钟)使样品沉底,避免气泡或挂壁导致上样损失。小心拔出梳子,将凝胶放入电泳槽,加满1×电泳缓冲液。用移液器将枪头伸入点样孔液面以下、接近孔底位置,缓慢推出样品——枪头悬在孔口上方推出的话,样品会漂浮扩散【1】。
第三步:电泳——盖好电泳槽盖,接通电源。DNA带负电,从负极(黑色插头)向正极(红色插头)泳动【1】。常用条件:恒压5~10 V/cm(按凝胶长度计算),电泳时间约30~60分钟,或目测Loading Buffer中的指示剂迁移至凝胶约2/3处时停止。
第四步:观察——电泳结束后,将凝胶放入凝胶成像仪【1】。不同染料需要不同激发光源:EB或GelRed类染料需紫外光(~300 nm)激发,发橙红色荧光;GelGreen或SYBR类染料可用蓝光(~488 nm)或254 nm紫外激发,发绿色荧光。确认您的成像仪与染料匹配,否则无法看到条带【1】。
① 省事
不用再四处采购琼脂糖、核酸染料、电泳液、Loading Buffer……一个试剂盒全部解决【1】。
② 安全
试剂盒通常配备新型核酸荧光染料,风险远低于传统EB(溴化乙锭)【1】。但仍建议戴手套操作——任何化学试剂都应避免直接接触皮肤。
③ 稳定
试剂经过精心优化,灵敏度高、稳定性好【1】。批次间差异小,实验结果可重复【1】。
如果你不想在试剂采购和配制上耗时间,杭州富沃克生物科技有限公司提供完整的核酸电泳试剂解决方案:

产品咨询:19850855600
邮箱:support@fwkbio.com
官网链接:琼脂糖凝胶电泳教学试剂盒高中生物PCR教学 含DNA Marker即用体验-杭州富沃克生物科技有限公司

参考文献
[1] 新课标生物实验室新增实验与试剂盒介绍——琼脂糖凝胶电泳试剂盒[J]. 教学仪器与实验, 2010(12). (试剂盒内容:琼脂糖4×0.25g、缓冲液50×20mL、核酸染料80μL、上样缓冲液6×80μL)
[2] 杭州富沃克生物科技有限公司. 50×TAE电泳缓冲液产品介绍[EB/OL]. https://www.fwkbio.com(具体产品页请访问官网搜索“TAE缓冲液”)
[3] 杭州富沃克生物科技有限公司. 科研专用6×DNA上样缓冲液产品介绍[EB/OL]. https://www.fwkbio.com(具体产品页请访问官网搜索“上样缓冲液”)
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