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溶菌酶 | Lysozyme | 鸡蛋清来源 | 核酸提取专用 | CAS:12650-88-3
别名:胞壁质酶、N-乙酰胞壁质聚糖水解酶、粘肽N-乙酰胞壁质聚糖水解酶、溶菌酶c
一、产品概述
富沃克生物推出的溶菌酶(Lysozyme)是一款高品质的分子生物学级工具酶。本品来源于鸡蛋清,以白色冻干粉或结晶粉末形式供应,酶活力≥20,000 U/mg。作为一种能水解细菌中黏多糖的碱性酶,溶菌酶通过特异性裂解细菌细胞壁中的肽聚糖,使细胞壁破裂、内容物逸出,从而实现细菌的快速溶解。本品适用于细菌DNA/RNA提取、蛋白纯化、原生质体制备、细胞破碎及各类分子生物学实验。
在细菌核酸提取和蛋白纯化实验中,细胞壁的破碎是决定目标产物得率与纯度的首要环节。革兰氏阳性菌具有厚实的肽聚糖细胞壁,机械破碎方法(如珠磨、超声)虽有效,但易导致核酸剪切和蛋白变性;化学裂解法则可能引入抑制下游酶促反应的杂质。溶菌酶通过酶学方法温和、高效地水解细胞壁,在释放胞内物质的同时最大限度地保护核酸与蛋白的天然活性,是细菌样本前处理中不可或缺的核心工具酶。
二、技术原理
溶菌酶的作用机制具有高度特异性。它作为一种糖苷水解酶,能够专一性地催化水解细菌细胞壁肽聚糖中N-乙酰胞壁酸(NAM)与N-乙酰氨基葡糖(NAG)之间的β-1,4糖苷键。这一水解反应使构成细胞壁骨架的不溶性黏多糖分解为可溶性糖肽,导致细胞壁的机械强度丧失,最终因细胞内的高渗透压而使细胞破裂、内容物逸出,从而实现细菌的溶解。
革兰氏阳性菌与阴性菌的敏感性差异:革兰氏阳性菌(G+)的细胞壁由厚达20-80nm的肽聚糖层构成,肽聚糖含量高,因此对溶菌酶非常敏感。相反,革兰氏阴性菌(G-)的细胞壁肽聚糖层很薄(仅2-3nm),且外层被一层外膜(脂多糖和磷脂双分子层)所覆盖,阻碍了溶菌酶接近其作用靶点,因此敏感性较弱。
EDTA的协同增效作用:当体系中加入EDTA时,EDTA能够螯合细菌外膜上起稳定作用的金属离子(如Ca²⁺),破坏外膜结构的完整性,从而提高革兰氏阴性菌对溶菌酶的敏感性。这一原理被广泛应用于大肠杆菌等革兰氏阴性菌的裂解方案中。
三、产品来源与结构
本品来源于鸡蛋清,通过先进的提取与纯化工艺制得。鸡蛋清是自然界中溶菌酶含量最丰富的来源之一,其裂菌效果优异。溶菌酶是由129个氨基酸残基构成的单一肽链,由4个二硫键交联而成,分子量约为14.3 kDa。其等电点(pI)高达11.35,在酸性介质中可稳定存在。
四、核心优势
1. 高酶活,高效裂解:酶活力≥20,000 U/mg,专为高效裂解细菌细胞壁设计。能够在短时间内有效裂解细菌细胞壁,显著缩短实验时间,提高核酸和蛋白的提取效率。
2. 分子生物学级品质:产品达到分子生物学级标准,不含DNase、RNase和Protease。确保在核酸提取过程中不会引入外源性核酸酶导致目标DNA/RNA的降解,保障提取产物的完整性和下游实验的可靠性。
3. 作用条件温和,保护生物大分子活性:与超声、珠磨等物理破碎方法相比,溶菌酶处理条件温和,可有效避免机械剪切力对基因组DNA的断裂以及对蛋白质的变性损伤。提取的核酸片段大、完整性好,蛋白保持天然活性。
4. 较宽的pH和温度适应性:在较宽的pH范围(6.0-9.0)内均具有活性。pH 6.2时,在0.02-0.10 M的离子强度范围内酶活最高。
5. 应用范围广泛:广泛应用于核酸提取、蛋白提取、包涵体复性和细胞培养等多个生物技术领域。具体包括细菌核酸和蛋白提取、质粒制备、原生质球制备、壳聚糖水解以及包涵体纯化(能消化细胞团并释放包涵体)。
6. 天然来源,生物相容性好:源自鸡蛋清,具有天然来源的优越性。生物相容性好,不会引入额外的化学成分。在生物制药、食品加工等领域具有较高的安全性。
7. 稳定性高,便于保存:在合理的温度和pH范围内具有良好的稳定性。冻干粉形式在-20℃干燥条件下可保存长达4年。
五、技术参数
| 参数项目 | 规格说明 |
|---|---|
| 产品名称 | 溶菌酶 / Lysozyme |
| CAS号 | 12650-88-3 |
| EC编号 | 3.2.1.17 |
| 来源 | 鸡蛋清 |
| 外观 | 白色或微白色冻干粉/结晶粉末 |
| 酶活力 | ≥20,000 U/mg |
| 分子量 | 约14.3 kDa |
| 等电点(pI) | 11.35 |
| 溶解性 | 溶于水(10-50 mg/mL) |
| 最适pH范围 | 6.0-9.0 |
| 最适离子强度 | pH 6.2时,0.02-0.10 M |
| 保存条件 | -20℃干燥保存 |
| 有效期 | 4年(-20℃干燥保存) |
六、主要应用场景
七、使用说明
储存液配制:
工作浓度:
常规细菌裂解推荐工作浓度为1-10 mg/mL,具体用量需根据菌种类型、菌量及实验体系优化。
对于革兰氏阳性菌,通常单独使用溶菌酶即可获得良好的裂解效果。
操作注意事项:
八、注意事项
九、储存条件与有效期
十、订购信息
本产品现货供应,提供1g、5g、25g、100g等多种规格。欢迎各分子生物学实验室、科研院所、生物医药企业及高校课题组来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。
富沃克生物 —— 专注生命科学工具,以高品质溶菌酶赋能细菌核酸与蛋白研究的每一个环节。
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