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8m尿素溶液

简要描述:8M尿素溶液是一种高浓度蛋白质变性剂。它能破坏氢键等非共价作用力,使蛋白质完全变性和溶解,常用于包涵体蛋白的复性前处理、难溶性蛋白的提取以及凝胶电泳的样品制备。该溶液也用于某些RNA的稳定与纯化步骤,是分子生物学和蛋白质化学研究中处理变性和难溶蛋白的关键试剂。

  • 产品型号:
  • 更新时间:2026-02-05
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详细介绍

8M尿素溶液 | 强变性剂 | 蛋白质变性电泳 | 包涵体溶解 | CAS:57-13-6

别名:尿素标准液、蛋白变性液、8摩尔尿素溶液

一、产品概述

富沃克生物推出的8M尿素溶液是一款高品质的分子生物学级强效蛋白质变性剂。本产品采用高纯尿素(Urea)为原料,以超纯水在洁净环境中精准配制,浓度准确(8mol/L)、变性能力强、溶液澄清透明。尿素,化学名称为碳酰胺(Carbamide),分子式为CH₄N₂O,分子量为60.06。作为最简单的有机化合物之一,尿素在蛋白质化学和分子生物学研究中扮演着不可或缺的角色

在蛋白质研究领域,尿素是一种经典的离液剂(chaotropic agent),能够有效破坏蛋白质二级、三级和四级结构中的氢键等非共价作用力,使蛋白质完全变性和溶解。8M尿素溶液是蛋白质变性电泳、包涵体蛋白溶解、蛋白质复性前处理以及核酸变性研究的核心试剂。在双向电泳(2-DE)等蛋白质组学研究中,样品溶液中尿素的浓度通常要求不低于8M

传统实验室自行配制8M尿素溶液不仅需要精确称量(480g/L),还面临溶解困难、浓度不准、易降解等突出问题。本产品以标准化生产替代人工配制,以即用型液体形式提供浓度精准、品质稳定的8M尿素溶液,让实验人员彻底告别繁琐耗时的配制过程。产品需冷藏保存防止分解,现货供应,欢迎生物化学实验室及科研单位老师选购。

二、技术原理

1. 尿素诱导蛋白质变性的分子机制

尿素对蛋白质的变性作用基于多种分子层面的协同效应。研究表明,尿素并非通过间接破坏水结构来发挥作用,而是通过直接攻击蛋白质主链和侧链来诱导变性。具体机制包括两个方面:一是通过氢键直接与肽链的酰胺基团(NH和CO基团)结合,破坏蛋白质内部的氢键网络;二是通过置换非极性基团周围溶剂壳层中的水分子,削弱疏水效应。这两种作用的协同效应使蛋白质从天然的有序构象转变为完全无规则的多肽链构象

2. 包涵体蛋白的溶解机制

在重组蛋白表达过程中,大肠杆菌等宿主细胞中常形成不溶性的包涵体(inclusion bodies)。8M尿素能够有效溶解包涵体中的聚集蛋白,其溶解度为70-90%。尿素通过破坏包涵体内蛋白分子间的氢键和疏水相互作用,使聚集的蛋白多肽链得以分散和溶解。与6M盐酸胍相比,尿素溶解包涵体的速度较慢、强度较弱,但具有不电离、呈中性、成本低等显著优势。溶解后的包涵体蛋白可选用多种色谱法进行纯化

3. 核酸变性研究中的应用

尿素同样能够破坏DNA和RNA二级结构中的氢键。在核酸研究中,8M尿素常用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(尿素-PAGE),使DNA双链完全打开,适用于核酸序列分析和结构研究

三、核心优势

1. 浓度精准,品质可靠

采用高纯尿素原料与超纯水在洁净环境中精准配制,浓度准确(8mol/L),溶液澄清透明、无杂质。8M尿素溶液的密度约为1.34 g/cm³(20℃)。每批次均经过严格质检,有效避免了自行配制时因称量误差、溶解不完全或水质问题导致的浓度偏差。

2. 即开即用,彻底告别繁琐配制

自行配制8M尿素溶液需精确称量480.5g尿素(分子量60.06),在约37℃条件下助溶,再定容至1L。尿素粉末在称量过程中易产生粉尘,且在溶解过程中需注意温度不能超过37℃,否则会生成氰酸盐导致蛋白氨基甲酰化。本产品开瓶即可直接使用,无需称量、加热溶解、过滤灭菌等繁琐步骤,显著节省实验准备时间,彻底杜绝配制过程中的浓度偏差和污染风险。

3. 变性能力强,适用范围广

8M浓度是尿素发挥强效变性作用的关键阈值。在双向电泳(2-DE)等蛋白质组学研究中,样品溶液中尿素的浓度通常要求不低于8M。本产品可确保蛋白质完全变性,适用于等电聚焦(IEF)、SDS-PAGE、双向电泳(2DE)等多种电泳方法的样品制备

4. 兼容多种下游实验

经8M尿素处理的蛋白质样品可广泛应用于蛋白质复性研究、离子交换色谱纯化、质谱分析酶解前处理等多种下游实验。尿素易于通过透析或超滤去除,不影响后续实验

5. 储存稳定,效期长

本产品在推荐的冷藏保存条件下可保持长期稳定。建议开封后尽快使用,以防影响后续实验效果

四、技术参数

参数项目规格说明
产品名称8M尿素溶液 / 8M Urea Solution
CAS号57-13-6
分子式CH₄N₂O
分子量60.06
浓度8mol/L(8M)
密度(20℃)约1.34 g/cm³
熔点132.7℃
外观无色透明液体
基质超纯水
保存条件冷藏(2-8℃)保存
有效期12个月

五、主要应用场景

应用领域具体用途
蛋白质变性电泳SDS-PAGE、等电聚焦(IEF)、双向电泳(2DE)的样品制备
包涵体蛋白溶解重组蛋白包涵体的溶解与提取
蛋白质复性前处理变性蛋白的复性研究
核酸变性研究变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(尿素-PAGE)
质谱分析前处理蛋白质的酶解消化
离子交换色谱变性条件下蛋白质的离子交换纯化

六、使用说明

包涵体蛋白溶解(参考方案)

  1. 将包涵体沉淀用8M尿素溶液重悬

  2. 可根据需要加入还原剂(如5-10mM DTT或20-50mM β-巯基乙醇)以打开二硫键

  3. 室温或4℃温和搅拌溶解适当时间

  4. 高速离心去除不溶物,取上清用于后续实验

等电聚焦样品制备(参考)

  • 8M尿素常与2M硫脲、4% CHAPS、1% DTT等配合使用

  • 样品制备过程中需注意避免加热超过37℃,以防蛋白发生氨甲酰化

蛋白质复性(参考)

  • 可采用逐步降低尿素浓度的方法实现复性:8M → 6M → 4M → 2M → 0M

  • 复性一般在尿素浓度降至4M左右时开始

  • 建议采用低浓度蛋白(0.1-1mg/mL)、平缓梯度和低温条件

注意事项

  • 使用前应将溶液充分摇匀

  • 尿素溶液不可加热超过37℃,否则会生成氰酸盐导致蛋白氨基甲酰化

  • 建议根据单次实验用量分装使用,避免反复冻融和长期室温放置

七、注意事项

  • 尿素在室温放置超过48小时可能对目的蛋白产生影响,因尿素在碱性条件下可使某些氨基酸发生酰基化

  • 建议开封后尽快使用,以防影响后续实验效果

  • 本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗

  • 为了您的安全和健康,操作时请穿实验服并佩戴一次性手套和口罩

  • 如发现溶液浑浊、沉淀或颜色变化,请勿使用

八、储存条件与有效期

  • 保存条件:冷藏(2-8℃)保存

  • 运输条件:冷藏运输

  • 有效期:12个月

  • 注意事项:开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果

九、订购信息

本产品现货供应,提供多种规格以满足不同实验需求,无菌灌装,即开即用。欢迎各生物化学实验室、分子生物学实验室、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具,以高品质8M尿素溶液赋能蛋白质变性、包涵体溶解与蛋白质组学研究的每一个环节。

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