细菌DNA提取试剂盒磁珠法 DNA/RNA提取 科研试剂 可免费开票

细菌DNA提取试剂盒（磁珠法）
细菌基因组DNA纯化｜革兰氏阳性阴性菌通用｜核酸提取纯化科研专用｜含溶菌酶/蛋白酶K裂解体系

别名：磁珠法细菌DNA提取试剂盒、细菌核酸提取磁珠试剂盒、病原微生物DNA提取试剂盒

一、产品概述

富沃克生物推出的细菌DNA提取试剂盒（磁珠法）是一款专为细菌样本设计的高效核酸纯化产品。本产品采用高结合力超顺磁珠与特异性裂解结合缓冲液，配合溶菌酶/蛋白酶K裂解体系，可高效裂解革兰氏阳性菌、阴性菌细胞壁，提取高纯度基因组DNA，有效去除蛋白、多糖及PCR抑制物。适用于细菌培养物、菌液、土壤样本、粪便样本、拭子样本、环境样本及临床标本中细菌DNA的提取与纯化，提取产物OD260/280值合格，可直接用于PCR、qPCR、16S rRNA测序、宏基因组测序、分子鉴定及细菌分型等下游实验。

在微生物分子生物学研究中，高质量基因组DNA的获取是菌种鉴定、病原检测、宏基因组分析及细菌分型等实验的基础。然而，革兰氏阳性菌与阴性菌的细胞壁结构差异显著——革兰氏阳性菌的细胞壁由厚达20-80nm的肽聚糖层构成，结构致密坚韧；革兰氏阴性菌的细胞壁虽肽聚糖层较薄（仅2-3nm），但外层覆盖着一层脂多糖外膜，同样阻碍裂解试剂的渗透。传统的细菌DNA提取方法（如CTAB法、酚氯仿法）操作繁琐、耗时长，且需要使用有毒有机试剂，对操作人员和环境均存在安全隐患。

本产品正是针对细菌样本提取的这一核心痛点而开发——将溶菌酶酶解破壁、蛋白酶K消化与磁珠法纯化技术相结合。溶菌酶可特异性水解革兰氏阳性菌细胞壁中的肽聚糖，使细胞壁结构变得疏松；蛋白酶K在裂解缓冲液体系中降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。两者协同作用，实现细菌细胞壁的彻底破碎和核酸的高效释放。配合优化的结合液与洗涤缓冲液，可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物，获得高纯度、高完整性的细菌基因组DNA。

磁珠法操作安全无毒，无需酚氯仿抽提，支持手工提取或全自动核酸提取仪配套使用。无菌无酶灌装，有效避免交叉污染，提供正规发票，现货供应，欢迎分子生物学实验室、微生物所及科研单位老师选购。

二、技术原理

本试剂盒基于磁珠法核酸提取的核心原理，通过“裂解→结合→洗涤→洗脱”四步流程，实现对细菌基因组DNA的高效提取与纯化。

溶菌酶与蛋白酶K双重裂解：细菌细胞壁是核酸释放的主要屏障。本试剂盒采用溶菌酶对细菌进行酶解处理。溶菌酶能够特异性水解革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖中的β-1,4糖苷键，使细胞壁结构变得疏松。对于革兰氏阴性菌，裂解体系中的表面活性剂协同破坏外膜结构，配合溶菌酶实现对阴性菌的有效裂解。随后加入裂解缓冲液和蛋白酶K，蛋白酶K在变性剂SDS中依然能保持高活性，高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。

磁珠特异性结合：在特定高盐结合液条件下，释放出的DNA被功能化的超顺磁性纳米磁珠高效吸附。磁珠表面经过特殊修饰，对核酸具有高亲和力和高选择性，而蛋白质、多糖及其他杂质则不被吸附。这一步骤是获得高纯度DNA的关键。

磁性分离与杂质去除：当磁珠-DNA复合物形成后，将离心管置于磁力架上。在外加磁场作用下，磁珠在数十秒内被快速聚集至管壁，此时可轻松吸弃含有杂质的溶液。通过结合液和洗涤液的多次洗涤，可有效去除残留的多糖、蛋白质及其他PCR抑制物。

高纯度DNA的洗脱：洗涤完成后，在低盐洗脱液条件下，DNA从磁珠表面被高效洗脱下来。所得即为高纯度、高完整性的细菌基因组DNA，OD260/280比值一般为1.7-1.9，可直接用于下游分子生物学实验。

三、核心优势

1. 革兰氏阳性阴性菌通用，裂解高效：采用溶菌酶与蛋白酶K双重裂解体系，可高效裂解革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌）和革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、肺炎克雷伯菌）的细胞壁。无需针对不同菌种更换提取方案。

2. 纯度高，有效去除多糖和蛋白：优化的裂解和洗涤体系可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物。提取的基因组DNA纯度高，OD260/280比值一般在1.7-1.9之间。完整度高（>15 kb），可直接用于对质量要求苛刻的下游实验。

3. 磁珠法操作，安全无毒：全程无需使用酚、氯仿等有毒有机试剂。无需进行耗时的醇类沉淀。对实验人员和环境更加友好安全。

4. 操作简便快速：操作流程标准化，手工操作时间少。与柱式法相比，大大减少离心次数，获得完整性更好的细菌基因组DNA。无需复杂的设备，配合磁力架即可完成手工提取。

5. 支持自动化高通量提取：支持32/48/96通量全自动核酸提取仪配套使用。可高效进行大样本量提取，适合大规模筛选和临床检测场景。

6. 下游应用广泛：提取的基因组DNA纯度高、完整性好，可直接用于PCR、qPCR、16S rRNA测序、宏基因组测序、分子鉴定、细菌分型、Southern blot及芯片分析等多种下游实验。

7. 无菌无酶灌装，品质可靠：在洁净环境中无菌无酶灌装，确保无DNase/RNase污染。从源头保障核酸样本的完整性与实验结果的可靠性。

四、技术参数

五、主要应用场景

六、使用说明

操作前准备：

1. 将磁珠从冷藏取出，室温平衡10分钟，使用前涡旋振荡10秒充分混匀

2. 自备材料：磁力架、水浴锅、离心机、1.5mL离心管

3. 对于革兰氏阳性菌，建议提前准备溶菌酶工作液

标准操作流程：

（一）样本预处理与裂解

1. 取适量细菌培养物（0.5-3.0mL），离心收集菌体沉淀

2. 加入溶菌酶工作液（革兰氏阳性菌尤为必要），重悬菌体

3. 加入裂解缓冲液和蛋白酶K

4. 55℃孵育适当时间，使细胞充分裂解、核酸释放

（二）核酸结合与磁性分离

1. 加入结合液和磁珠悬浮液

2. 充分混匀，使DNA与磁珠结合

3. 将离心管置于磁力架上，静置至磁珠完全吸附

4. 小心吸弃上清液

（三）洗涤

1. 加入洗涤液，重悬磁珠

2. 再次置于磁力架上，吸弃上清

3. 重复洗涤步骤，充分去除杂质

（四）洗脱

1. 加入洗脱液，轻轻混匀使DNA从磁珠上释放

2. 置于磁力架上，将含有DNA的上清液转移至新离心管

3. 所得即为纯化的细菌基因组DNA，可直接用于下游实验

七、注意事项

• 磁珠使用前务必要回温至室温并充分摇匀，否则可能影响样品的回收效率

• 革兰氏阳性菌细胞壁较厚，建议适当延长溶菌酶处理时间以确保完全破壁

• 操作过程要严格保证无核酸酶污染，建议使用无菌低吸附滤芯枪头和离心管

• 土壤、粪便等环境样本中腐殖酸含量较高，建议适当增加洗涤次数以确保DNA纯度

• 如需自动化提取，请确认试剂盒与所用核酸提取仪的适配性

• 本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗

八、储存条件与有效期

• 保存条件：不同组分按标签要求分别保存（室温、2-8℃）

• 运输条件：冰袋或湿冰运输

• 有效期：12-24个月（规定储存条件下）

九、订购信息

本产品现货供应，提供50次、100次、200次等多种规格，以及64次、96次、128次等预分装规格。无菌无酶灌装，有效避免交叉污染。支持手工提取和自动化提取两种操作模式，适配32/48/96通量核酸提取仪。提供正规科研用途发票，支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、微生物研究所、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具，以高效细菌DNA提取方案赋能微生物研究与分子检测的每一个环节。

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