mRNA纯化试剂盒 磁珠法 核酸提取试剂盒 科研试剂 可免费开票 FWK

mRNA纯化试剂盒 | 磁珠法 | Oligo(dT)磁珠 | mRNA分离富集试剂盒 | 核酸提取纯化科研专用

别名：mRNA捕获磁珠试剂盒、真核mRNA提取试剂盒、Poly(A)+RNA纯化试剂盒

一、产品概述

富沃克生物推出的mRNA纯化试剂盒是一款基于磁珠法的高品质mRNA分离富集产品。本产品采用链霉亲和素磁珠偶联Oligo(dT)₂₅或Oligo(dT)包被磁珠，通过磁珠表面寡聚dT序列与mRNA 3‘端poly(A)尾的特异性碱基配对，结合优化的结合液与洗涤缓冲液，可快速高效地从总RNA中分离纯化高完整性mRNA。

在真核生物基因表达研究中，mRNA（信使核糖核酸）是承载遗传信息从DNA向蛋白质传递的核心分子。从总RNA中高质量地分离纯化mRNA，是基因表达定量、转录组分析及功能基因组学研究的首要环节。然而，mRNA仅占总RNA的1%-5%，且极易被RNase降解，传统的分离方法操作繁琐、耗时长，难以满足现代分子生物学实验对纯度和完整性的高要求。本产品正是针对这一核心痛点而开发——以Oligo(dT)磁珠的特异性捕获替代传统的柱式或沉淀法，通过磁珠表面寡聚dT序列与mRNA 3‘端poly(A)尾的特异性碱基配对，在15-30分钟内即可从总RNA中高效捕获高纯度、高完整性的mRNA。

纯化过程仅需孵育、洗涤、洗脱三步，操作简便、回收效率高。无菌无酶灌装，有效避免RNase污染，纯化产物可直接用于后续分子生物学实验。产品提供多种规格（50次/200次/800次），可开具正规发票，现货供应，欢迎分子生物学实验室及科研单位老师选购。

二、技术原理

本试剂盒基于Oligo(dT)磁珠与mRNA poly(A)尾的特异性杂交原理实现mRNA的高效分离。

Oligo(dT)-poly(A)特异性结合：绝大多数真核生物mRNA的3’端含有一段由20-250个腺苷酸残基组成的poly(A)尾。本试剂盒采用的磁珠表面共价偶联了Oligo(dT)₂₅序列。在优化的结合缓冲液体系中，Oligo(dT)与mRNA的poly(A)尾通过碱基互补配对原则（A-T配对）形成稳定的杂交体。这一结合具有高度的序列特异性——仅带有poly(A)尾的mRNA被捕获，而rRNA、tRNA及其他非poly(A)RNA不会被非特异性吸附。

磁珠介导的固相分离：当Oligo(dT)磁珠与mRNA结合形成杂交体-磁珠复合物后，借助外加磁场即可将磁珠从溶液中快速分离。磁珠具有超顺磁性——在磁场中能快速响应实现分离，磁场移除后无剩磁，便于操作和回收。通过磁力架的吸附，操作者可轻松弃去含有非目标RNA和杂质的溶液，而目标mRNA则随磁珠保留在管底。

高盐结合与低盐洗脱：结合过程在高盐缓冲液中进行，高盐浓度可促进Oligo(dT)与poly(A)尾之间的氢键形成。经过多次高盐洗涤液洗涤后，非特异性吸附的RNA、蛋白质及其他杂质被彻底去除。洗脱时使用低盐缓冲液或无RNase水，低盐环境使Oligo(dT)-poly(A)杂交体不稳定，mRNA从磁珠表面释放，即可获得高纯度的mRNA。

链霉亲和素-生物素系统的增强：部分型号采用生物素标记的Oligo(dT)与链霉亲和素包被磁珠相结合。链霉亲和素与生物素之间的亲和力极高（Kd≈10⁻¹⁵M），结合稳定、选择性极强。磁珠偶联Oligo(dT)₂₅的量约为300-400 pmol/mg磁珠，每毫克磁珠可纯化约2-3μg mRNA，每毫升磁珠可纯化约10-15μg mRNA。

三、核心优势

1. 高特异性捕获，纯度高：基于Oligo(dT)与poly(A)尾的碱基互补配对，对带有poly(A)尾的mRNA具有高度特异性选择。有效避免rRNA、tRNA等非目标RNA的共纯化。所得mRNA纯度高，可直接用于对质量要求苛刻的下游实验。

2. 高回收效率，得率稳定：经反复测试和优化的提取体系，可分离纯化获得总RNA中90%以上的mRNA。mRNA回收产率可达95%以上。适用于0.01-10μg完整度良好的总RNA样本。

3. 操作快速简便，15-30分钟完成：整个纯化过程仅需孵育、洗涤、洗脱三步。全部操作在同一离心管中完成，无需离心或复杂设备。15-30分钟即可获得高纯度mRNA。

4. 无菌无酶，保障RNA完整性：无菌无酶灌装，有效避免RNase污染。纯化后的mRNA可直接用于下游实验，无需再经RNA沉淀纯化。操作过程严格保证无RNase和核酸污染。

5. 磁珠可重复使用，经济高效：Oligo(dT)磁珠可重复使用多达3次。在首次分离后，用洗涤缓冲液清洗磁珠，即可再次用于mRNA捕获。显著降低单次实验成本。

6. 兼容自动化高通量平台：适用于磁棒式高通量核酸提取仪。支持自动化操作，满足高通量mRNA纯化需求。

7. 适配多种下游应用：纯化后的mRNA可直接用于RT-PCR、qPCR、高通量测序、cDNA文库构建、Northern blot、RACE及mRNA疫苗研发等多种下游实验。

8. 多种规格，灵活选择：提供50次、200次、800次等多种规格。满足从日常科研到高通量筛选的不同通量需求。

四、技术参数

五、主要应用场景

六、使用说明

操作前准备：

1. 将磁珠从4℃取出，室温静置30分钟备用

2. 充分振荡混匀磁珠，确保磁珠悬浮均匀、无肉眼可见颗粒

3. 建议使用RIN值≥7.0的总RNA样本，以确保mRNA的完整性

标准操作流程（三步法）：

第1步：孵育结合（约5-10分钟）

1. 取适量总RNA（0.01-10μg）于无RNase离心管中

2. 加入结合缓冲液和Oligo(dT)磁珠悬浊液

3. 充分混匀，室温孵育3-5分钟，使mRNA与磁珠充分结合

第2步：洗涤（约5-10分钟）

1. 将离心管置于磁力架上，静置1-2分钟至磁珠完全吸附

2. 小心吸弃上清液

3. 加入洗涤液，充分吹打混匀重悬磁珠

4. 再次置于磁力架上，静置后吸弃上清

5. 重复洗涤2-3次

第3步：洗脱（约2-5分钟）

1. 加入适量无RNase洗脱缓冲液或无菌水

2. 充分混匀，室温孵育1-2分钟

3. 置于磁力架上，静置后小心转移上清至新离心管

4. 所得即为纯化的mRNA，可直接用于下游实验

磁珠重复使用（可选）：

• 首次分离完成后，可用洗涤缓冲液B清洗磁珠2次

• 以4倍体积的结合缓冲液稀释洗脱后的磁珠

• 室温孵育并混匀3-5分钟，即可再次用于mRNA分离

七、注意事项

• 磁珠使用前务必要回温至室温，并充分混匀，否则可能影响样品的回收效率

• 操作过程要严格保证无RNase和核酸污染，建议使用无RNase的耗材并在洁净区域操作

• 为获得好的纯化效果，提取的总RNA完整度应良好，确保RIN值在7.0及以上

• 不同总RNA起始量对应不同的mRNA产量，建议根据实验需求选择合适的样本投入量

• 磁珠可重复使用最多3次，但建议在首次使用时评估回收效率

八、储存条件与订购信息

• 保存条件：磁珠需4℃冷藏保存，其他组分按说明书要求保存

• 运输条件：冰袋或湿冰运输

• 包装规格：50次、200次、800次

• 发票：可开具正规发票，支持对公转账

本产品现货供应，提供多种规格以满足不同通量需求。欢迎各分子生物学实验室、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具，以高品质mRNA纯化试剂盒赋能基因表达与转录组研究的每一个环节。

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