细菌DNA提取试剂盒柱式法 DNA/RNA提取 科研试剂 可免费开票

细菌DNA提取试剂盒（柱式法）
硅胶膜离心柱｜细菌基因组DNA纯化｜革兰氏阳性阴性菌通用｜科研试剂｜含正规发票

别名：柱式细菌DNA提取试剂盒、离心柱法细菌核酸提取试剂盒

一、产品概述

富沃克生物推出的细菌DNA提取试剂盒（柱式法）是一款专为微生物分子生物学研究设计的高品质基因组DNA纯化产品。本产品采用特异性结合DNA的硅胶膜离心柱与优化的裂解结合体系，配合溶菌酶/蛋白酶K消化，可高效裂解革兰氏阳性菌、阴性菌细胞壁，有效去除蛋白质、多糖及PCR抑制物，获得高纯度基因组DNA。产品适用于细菌培养物、菌液、土壤及拭子样本中DNA的提取纯化，提取产物OD260/280合格，可直接用于PCR、qPCR、16S rRNA测序、酶切分析及分子鉴定等下游实验。

在微生物分子生物学研究中，高质量基因组DNA的获取是菌种鉴定、病原检测、宏基因组分析及细菌分型等实验的基石。然而，革兰氏阳性菌与阴性菌的细胞壁结构差异显著——革兰氏阳性菌的细胞壁由厚达20-80nm的肽聚糖层构成，结构致密坚韧；革兰氏阴性菌的细胞壁虽肽聚糖层较薄（仅2-3nm），但外层覆盖着脂多糖外膜，同样阻碍裂解试剂的渗透。传统的细菌DNA提取方法（如CTAB法、酚氯仿法）操作繁琐、耗时长，且需要使用有毒有机试剂。

本产品正是针对细菌样本提取的这一核心痛点而开发——将溶菌酶酶解破壁、蛋白酶K消化与硅胶膜离心柱纯化技术相结合。溶菌酶可特异性水解革兰氏阳性菌细胞壁中的肽聚糖，使细胞壁结构变得疏松；蛋白酶K在裂解缓冲液体系中高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。两者协同作用，实现细菌细胞壁的彻底破碎和核酸的高效释放。配合优化的结合液与洗涤缓冲液，可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物，获得高纯度、高完整性的细菌基因组DNA。

柱式法操作安全无毒，无需酚氯仿抽提，操作流程标准化，15-30分钟即可完成。无菌无酶灌装，有效避免交叉污染，提供正规发票，现货供应，欢迎分子生物学实验室、微生物所及科研单位老师选购。

二、技术原理

本试剂盒基于硅胶膜离心柱核酸分离技术，结合优化的裂解体系，实现对细菌基因组DNA的高效提取与纯化。

高效裂解与核酸释放：细菌细胞壁是核酸释放的主要屏障。本试剂盒采用溶菌酶对细菌进行酶解处理。溶菌酶能够特异性水解革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖中的β-1,4糖苷键，使细胞壁结构变得疏松。对于革兰氏阴性菌，裂解体系中的表面活性剂协同破坏外膜结构，配合溶菌酶实现对阴性菌的有效裂解。随后加入裂解缓冲液和蛋白酶K，蛋白酶K在变性剂中依然能保持高活性，高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。

离心柱的特异性吸附：样品裂解后，DNA被释放到溶液中。在高离序盐状态下，将裂解产物转移至硅胶膜离心柱中，硅基质膜材料可高效、专一地吸附DNA分子，而蛋白质、多糖及其他杂质则不被吸附。离心吸附柱中采用的硅基质材料为新型材料，吸附容量大、洗脱效率高。

杂质的彻底去除：DNA被吸附于硅胶膜上后，通过抑制物去除液和漂洗液的多次离心洗涤，可有效去除残留的多糖、蛋白质、盐离子及其他PCR抑制物。

高纯度DNA的洗脱：洗涤完成后，在低盐条件下（洗脱缓冲液），DNA从硅胶膜上被高效洗脱下来。所得即为高纯度、高完整性的细菌基因组DNA，OD260/280比值一般为1.7-1.9，长度可达30-50kb，可直接用于下游分子生物学实验。

三、核心优势

1. 革兰氏阳性阴性菌通用，裂解高效

采用溶菌酶与蛋白酶K双重裂解体系，可高效裂解革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌）和革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、肺炎克雷伯菌）的细胞壁。无需针对不同菌种更换提取方案。

2. 纯度高，有效去除多糖和蛋白

优化的裂解和洗涤体系可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物。提取的基因组DNA纯度高，OD260/280比值一般在1.7-1.9之间，长度可达30-50kb。可直接用于对质量要求苛刻的下游实验。

3. 柱式法操作，安全无毒

全程无需使用酚、氯仿等有毒有机试剂。无需进行耗时的醇类沉淀。对实验人员和环境更加友好安全。

4. 操作快速简便，15-30分钟完成

操作流程标准化，单个样品操作一般可在15-30分钟内完成。离心吸附柱内硅基质膜采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。不会发生离心柱堵塞现象。

5. 高得率，满足实验需求

单个纯化柱最大可吸附30 μg基因组DNA。产率一般在5-20μg/mL过夜培养的饱和菌液（10⁸-10⁹个细胞）。

6. 下游应用广泛

提取的基因组DNA纯度高、完整性好，片段可达30-50kb。可直接用于酶切、PCR、qPCR、16S rRNA测序、Southern blot、文库构建、分子鉴定及细菌分型等多种下游实验。

四、技术参数

五、主要应用场景

六、使用说明

操作前准备：

1. 检查试剂盒各组分的保存状态，如有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用

2. 自备材料：水浴锅、离心机（可达13,000rpm）、1.5mL离心管

3. 对于革兰氏阳性菌，需自备溶菌酶（Lysozyme）

标准操作流程：

（一）样本预处理与裂解

1. 取适量细菌培养物（1-5mL），离心收集菌体沉淀

2. 加入溶菌酶工作液（革兰氏阳性菌尤为必要），重悬菌体

3. 加入裂解缓冲液和蛋白酶K

4. 适当温度孵育，使细胞充分裂解、核酸释放

（二）DNA结合

1. 加入结合液，混匀

2. 将混合液转移至离心吸附柱中

3. 离心使DNA吸附于硅胶膜上

（三）洗涤

1. 加入抑制物去除液，离心洗涤

2. 加入漂洗液（已按要求加入无水乙醇），离心洗涤

3. 重复洗涤步骤一次

（四）洗脱

1. 将离心吸附柱转移至新的收集管中

2. 向吸附膜中央加入洗脱缓冲液

3. 室温放置2-5分钟，离心洗脱

4. 收集含有基因组DNA的洗脱液，-20℃保存备用

七、注意事项

• 革兰氏阳性菌细胞壁较厚，建议适当延长溶菌酶处理时间以确保完全破壁

• 操作过程要严格保证无核酸酶污染，建议使用无菌低吸附滤芯枪头和离心管

• 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应

• DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0）

• 本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗

八、储存条件与有效期

• 保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下密封保存

• 运输条件：常温运输

• 有效期：12个月（自生产日期起）

九、订购信息

本产品现货供应，提供50次、100次、200次等多种规格，无菌无酶灌装，有效避免交叉污染。提供正规科研用途发票，支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、微生物研究所、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具，以高效柱式细菌DNA提取方案赋能微生物研究与分子检测的每一个环节。

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