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真菌DNA提取纯化试剂盒柱式法 DNA/RNA提取 科研试剂 可免费开票

简要描述:该柱式法真菌DNA提取纯化试剂盒是实验室核心耗材,可高效裂解真菌细胞壁与细胞膜,借助硅胶柱特异性吸附技术,快速分离基因组DNA与蛋白、多糖等杂质,获得高纯度、高完整性DNA,为PCR、测序、基因克隆等下游分子生物学实验提供可靠样本支撑。淘宝购买链接:真菌DNA提取纯化试剂盒柱式法 DNA/RNA提取 科研试剂 可免费开票联系

  • 产品型号:ZJZ606
  • 更新时间:2025-12-10
  • 访  问  量:189

详细介绍

真菌DNA提取纯化试剂盒(柱式法)
硅胶膜离心柱|真菌基因组DNA纯化|酵母/霉菌/蕈菌通用|科研试剂|含正规发票

别名:柱式真菌DNA提取试剂盒、离心柱法真菌核酸提取试剂盒

一、产品概述

富沃克生物推出的真菌DNA提取纯化试剂盒(柱式法)是一款专为真菌分子生物学研究设计的高品质基因组DNA纯化产品。本产品采用特异性结合DNA的硅胶膜离心柱与优化的裂解结合体系,配合液氮研磨/玻璃珠破壁及蛋白酶K消化,可高效裂解酵母、霉菌、蘑菇等真菌细胞壁,有效去除多糖、多酚及PCR抑制物,获得高纯度基因组DNA。产品适用于真菌培养物、菌丝体、孢子、子实体及土壤样本中DNA的提取纯化,提取产物OD260/280合格,可直接用于PCR、qPCR、18S rDNA测序、ITS区段分析及分子鉴定等下游实验。

在真菌分子生物学研究中,高质量基因组DNA的获取是物种鉴定、系统发育分析、基因功能研究及病原检测等实验的基础。然而,真菌的细胞壁成分复杂多样——酵母细胞壁主要由葡聚糖和甘露聚糖构成,霉菌细胞壁含有几丁质、纤维素等多种组分,而大型真菌(蕈菌)的子实体则富含多糖和多酚类物质。不同真菌类群的细胞壁结构差异显著,使得真菌DNA提取成为分子生物学实验中公认的难点之一。传统的真菌DNA提取方法(如CTAB法、酚氯仿法)操作繁琐、耗时长,且需要使用有毒有机试剂,对操作人员和环境均存在安全隐患。

本产品正是针对真菌样本提取的这一核心痛点而开发——将液氮研磨或玻璃珠机械破壁、蛋白酶K消化与硅胶膜离心柱纯化技术相结合。液氮研磨可在超低温下将真菌组织粉碎为细腻粉末,有效破坏坚韧的细胞壁结构;蛋白酶K在优化的裂解体系中高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。两者协同作用,实现真菌细胞壁的彻底破碎和核酸的高效释放。配合优化的结合液与洗涤缓冲液,可有效去除多糖、多酚、蛋白质及其他PCR抑制物,获得高纯度、高完整性的真菌基因组DNA。

柱式法操作安全无毒,无需酚氯仿抽提,操作流程标准化,15-30分钟即可完成。无菌无酶灌装,有效避免交叉污染,提供正规发票,现货供应,欢迎分子生物学实验室、微生物所及科研单位老师选购。

二、技术原理

本试剂盒基于硅胶膜离心柱核酸分离技术,结合优化的裂解体系,实现对真菌基因组DNA的高效提取与纯化

高效裂解与核酸释放:真菌细胞壁结构致密、成分复杂,是核酸释放的主要屏障。本试剂盒采用液氮研磨或玻璃珠研磨对真菌样本进行机械破壁。液氮研磨可在超低温条件下将真菌菌丝体、孢子或子实体快速粉碎为细腻粉末,有效破坏细胞壁的物理结构。针对孢子和液体培养的真菌细胞,也可选用玻璃珠法进行破壁处理。裂解缓冲液(含SDS等表面活性剂)进一步破坏细胞膜结构,蛋白酶K高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。三者协同作用,使基因组DNA从核蛋白复合物中充分释放到溶液中

离心柱的特异性吸附:样品裂解后,DNA被释放到溶液中。在高离序盐状态下,将裂解产物转移至硅胶膜离心柱中,硅基质膜材料可高效、专一地吸附DNA分子,而蛋白质、多糖及其他杂质则不被吸附。离心吸附柱中采用的硅基质材料为新型材料,吸附容量大、洗脱效率高

杂质的彻底去除:DNA被吸附于硅胶膜上后,通过多次柱漂洗可有效去除残留的多糖、多酚、蛋白质、盐离子及其他PCR抑制物。独特的缓冲液体系可高效去除真菌组织中富含的多糖和酚类物质,保障DNA产物的高纯度。

高纯度DNA的洗脱:洗涤完成后,在低盐条件下(洗脱缓冲液),DNA从硅胶膜上被高效洗脱下来。所得即为高纯度、高完整性的真菌基因组DNA,OD260/280比值一般在1.7-1.9之间,片段大小可达20-50Kb,可直接用于下游分子生物学实验。

三、核心优势

1. 适用范围广,酵母/霉菌/蕈菌通用

本试剂盒适用于绝大多数真菌材料,包括酵母(S. cerevisiaeS. pombPichia pastoris等)、霉菌(黑曲霉、木霉、青霉菌等)以及蕈菌(香菇、金针菇等)。同时适用于部分细菌的基因组DNA提取。无论是液体培养物、固体培养的菌丝体、孢子还是子实体,均可获得高质量的基因组DNA

2. 纯度高,有效去除多糖多酚

真菌组织富含多糖和多酚类物质,这些成分极易与DNA共沉淀,严重影响DNA纯度并抑制下游酶促反应。本试剂盒采用独特的缓冲液体系和多次柱漂洗步骤,可高效去除多糖、多酚、蛋白质及其他PCR抑制物。提取的基因组DNA纯度高,OD260/280比值一般在1.7-1.9之间,可直接用于对质量要求苛刻的下游实验。

3. DNA片段大,完整性好

提取的真菌基因组DNA片段大小一般在20-50Kb左右。片段大、完整性好,特别适合需要进行Southern blot、文库构建等对DNA完整性要求较高的实验

4. 柱式法操作,安全无毒

全程无需使用酚、氯仿等有毒有机试剂。无需进行耗时的醇类沉淀。对实验人员和环境更加友好安全

5. 操作快速简便,15-30分钟完成

操作流程标准化,单个样品操作一般可在15-30分钟内完成。离心吸附柱内硅基质膜采用特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。不会发生离心柱堵塞现象。

6. 得率高,满足实验需求

从100mg新鲜真菌样品中一般可获得1.5-5μg基因组DNA。提取的DNA可直接用于酶切、PCR、qPCR、Southern blot、文库构建等多种下游实验

四、技术参数

参数项目规格说明
产品名称真菌DNA提取纯化试剂盒(柱式法)
提取原理液氮研磨/玻璃珠破壁 + 蛋白酶K消化 + 硅胶膜离心柱纯化
适用样本真菌培养物、菌丝体、孢子、子实体、土壤样本等
适用菌种酵母、霉菌、蕈菌等绝大多数真菌
样本处理量液体培养物0.1-3mL;真菌菌丝/孢子/子实体0.1-0.5g
DNA得率1.5-5 μg/100mg新鲜真菌样品
DNA纯度OD260/280比值1.7-1.9
DNA片段大小20-50Kb
提取时间15-30分钟
安全特性无需酚氯仿抽提
保存条件室温(15-25℃)保存12个月
包装规格50次 / 100次 / 200次
发票提供正规科研用途发票

五、主要应用场景

应用领域具体用途
真菌物种鉴定18S rDNA/ITS区段扩增与测序、分子系统发育分析
病原真菌检测临床样本、食品及环境中病原真菌的PCR/qPCR检测
基因功能研究真菌基因的PCR扩增、克隆与表达分析
分子标记辅助育种RAPD、RFLP、AFLP等分子标记分析
Southern blotDNA杂交分析
文库构建基因组文库、宏基因组文库构建
土壤微生物研究土壤样本中真菌群落的分子生物学分析

六、使用说明

操作前准备

  1. 检查试剂盒各组分的保存状态,如有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,摇匀后使用

  2. 自备材料:液氮及研磨设备、水浴锅(65℃)、离心机、无水乙醇

  3. 使用前在漂洗液中按说明书要求加入指定量的无水乙醇

标准操作流程

(一)样本预处理与破壁

  1. 称取0.1-0.5g湿的真菌菌丝、孢子、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀

  2. 在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉

  3. 转移细粉(新鲜真菌组织100mg或干重组织20mg)到1.5mL离心管中

(二)细胞裂解与核酸释放

  1. 加入裂解缓冲液和RNase A

  2. 65℃孵育适当时间,使细胞充分裂解、核酸释放

(三)杂质去除与DNA结合

  1. 离心去除蛋白质、多糖及细胞残片

  2. 加入结合液,混匀后将全部溶液转移至离心吸附柱中

  3. 离心使DNA吸附于硅胶膜上

(四)洗涤

  1. 加入漂洗液,离心洗涤

  2. 重复洗涤步骤,充分去除杂质

(五)洗脱

  1. 将离心吸附柱转移至新的收集管中

  2. 向吸附膜中央加入洗脱缓冲液

  3. 室温放置2-5分钟,离心洗脱

  4. 收集含有基因组DNA的洗脱液,-20℃保存备用

七、注意事项

  • 真菌细胞壁较厚,建议充分研磨以确保完全破壁

  • 操作过程要严格保证无核酸酶污染,建议使用无菌低吸附滤芯枪头和离心管

  • 裂解液如产生沉淀,可室温放置或37℃水浴溶解后使用

  • 建议使用新鲜真菌样品,样品采集后应液氮速冻,-80℃保存

  • 本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗

八、储存条件与有效期

  • 保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下密封保存

  • RNase A:需-20℃保存

  • 运输条件:常温运输

  • 有效期:12个月(自生产日期起)

九、订购信息

本产品现货供应,提供50次、100次、200次等多种规格,无菌无酶灌装,有效避免交叉污染。提供正规科研用途发票,支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、微生物研究所、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具,以高效柱式真菌DNA提取方案赋能微生物研究与分子检测的每一个环节。

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