酵母基因组提取纯化试剂盒柱式法 科研试剂 可免费开发票 FWKNE

酵母基因组提取纯化试剂盒（柱式法）
离心柱型｜酵母DNA提取｜真菌核酸纯化｜科研试剂｜含正规发票

别名：柱式酵母DNA提取试剂盒、酵母基因组DNA快速提取试剂盒

一、产品概述

富沃克生物推出的酵母基因组提取纯化试剂盒（柱式法）是一款专为酵母分子生物学研究设计的高品质基因组DNA纯化产品。本产品采用特异性结合DNA的硅胶膜离心柱与优化的裂解结合体系，配合溶壁酶（Lyticase）与蛋白酶K双重消化，可高效裂解酵母细胞壁，有效去除多糖、蛋白及PCR抑制物，获得高纯度基因组DNA。

在酵母分子生物学研究中，高质量基因组DNA的获取是菌种鉴定、基因功能研究、遗传转化验证及工业菌株改造的基础。然而，酵母细胞壁结构致密、成分复杂——酿酒酵母细胞壁主要由葡聚糖（约占30-40%）、甘露聚糖（约占30-40%）和几丁质（约占1-3%）构成，三者相互交联形成坚韧的三维网状结构。普通裂解液无法直接穿透如此致密的细胞壁。传统的酵母DNA提取方法（如蜗牛酶法、液氮研磨法）操作繁琐、耗时长，且需要使用有毒有机试剂。

本产品正是针对酵母样本提取的这一核心痛点而开发——将溶壁酶酶解破壁、蛋白酶K消化与硅胶膜离心柱纯化技术相结合。溶壁酶可特异性水解酵母细胞壁中的β-1,3-葡聚糖等多糖成分，使细胞壁结构变得疏松；蛋白酶K在优化的裂解体系中高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。两者协同作用，实现酵母细胞壁的彻底破碎和核酸的高效释放。配合优化的结合液与洗涤缓冲液，可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物，获得高纯度、高完整性的酵母基因组DNA。

产品适用于酵母培养物、菌液、发酵液、菌落及含酵母样本中DNA的提取纯化，提取产物OD260/280比值1.7-1.9，可直接用于PCR、qPCR、18S rDNA测序、酶切分析及分子鉴定等下游实验。

柱式法操作安全无毒，无需酚氯仿抽提，操作流程标准化，30-60分钟即可完成。无菌无酶灌装，有效避免交叉污染，提供正规发票，现货供应，欢迎分子生物学实验室、微生物所及科研单位老师选购。

二、技术原理

本试剂盒基于硅胶膜离心柱核酸分离技术，结合优化的裂解体系，实现对酵母基因组DNA的高效提取与纯化。

高效裂解与核酸释放：酵母细胞壁结构致密、成分复杂，是核酸释放的主要屏障。本试剂盒采用溶壁酶（Lyticase）对酵母细胞进行酶解处理。溶壁酶能够特异性水解酵母细胞壁中的β-1,3-葡聚糖等成分，使细胞壁结构变得疏松。随后，独特的结合液与蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶。蛋白酶K在变性剂中依然能保持高活性，高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。三者协同作用，使基因组DNA从核蛋白复合物中充分释放到溶液中。

离心柱的特异性吸附：样品裂解后，DNA被释放到溶液中。在高离序盐状态下，将裂解产物转移至硅胶膜离心柱中，硅基质膜材料可高效、专一地吸附DNA分子。其原理为：在高盐和低pH条件下，阳离子桥能够中和DNA与硅醇基团之间的表面负电荷，使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面；而蛋白质、多糖及其他杂质则不被吸附。离心吸附柱中采用的硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。

杂质的彻底去除：DNA被吸附于硅胶膜上后，通过抑制物去除液和漂洗液的多次离心洗涤，可有效去除残留的多糖、蛋白质、盐离子及其他PCR抑制物。多次柱漂洗确保高纯度。

高纯度DNA的洗脱：洗涤完成后，在低盐、高pH值条件下，DNA从硅胶膜上被高效洗脱下来。所得即为高纯度、高完整性的酵母基因组DNA，OD260/280比值一般在1.7-1.9之间，片段大小可达20-50Kb，可直接用于下游分子生物学实验。

三、核心优势

1. 溶壁酶与蛋白酶K双重裂解，裂解高效

采用溶壁酶与蛋白酶K双重裂解体系，溶壁酶可特异性水解酵母细胞壁中的β-1,3-葡聚糖等多糖成分，配合蛋白酶K高效降解蛋白质。两者协同作用，实现酵母细胞壁的彻底破碎和核酸的高效释放。部分产品已包含溶壁酶，无需另外购买破壁酶。

2. 纯度高，有效去除多糖和蛋白

优化的裂解和洗涤体系可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物。提取的基因组DNA纯度高，OD260/280比值一般在1.7-1.9之间，片段大小可达20-50Kb。可直接用于对质量要求苛刻的下游实验。

3. 柱式法操作，安全无毒

全程无需使用苯酚、氯仿等有毒有机试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。对实验人员和环境更加友好安全。

4. 操作快速简便，30-60分钟完成

操作流程标准化，单个样品裂解后操作一般可在30分钟内完成。离心吸附柱内硅基质膜采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好，不会发生离心柱堵塞现象。

5. 得率高，满足实验需求

约3mL处于指数生长期的酵母培养液一般一次抽提可纯化出10-15μg的高质量基因组DNA；从2mL酵母菌液中也可获得5-10μg DNA。提取的DNA可直接用于下游多种实验。

6. 下游应用广泛

提取的基因组DNA纯度高、完整性好，可直接用于PCR、qPCR、18S rDNA测序、酶切分析、Southern blot、文库构建及分子鉴定等多种下游实验。

四、技术参数

五、主要应用场景

六、使用说明

操作前准备：

1. 检查试剂盒各组分的保存状态，如有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用

2. 自备材料：水浴锅、台式离心机（可达13,000rpm）、1.5mL离心管

3. 使用前在漂洗液中按说明书要求加入指定量的无水乙醇

标准操作流程：

（一）样本预处理与破壁

1. 取约3mL处于指数生长期的酵母培养液，离心收集菌体沉淀

2. 加入溶壁酶（Lyticase）工作液，重悬菌体，适当温度孵育去除细胞壁

（二）细胞裂解与核酸释放

1. 加入结合液和蛋白酶K，迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶

2. 适当温度孵育，使细胞充分裂解、核酸释放

（三）DNA结合

1. 将裂解产物转移至离心吸附柱中

2. 离心使DNA在高离序盐状态下选择性吸附于硅基质膜上

（四）洗涤

1. 加入抑制物去除液，离心洗涤

2. 加入漂洗液（已按要求加入无水乙醇），离心洗涤

3. 重复洗涤步骤，充分去除杂质

（五）洗脱

1. 将离心吸附柱转移至新的收集管中

2. 向吸附膜中央加入洗脱缓冲液

3. 室温放置2-5分钟，离心洗脱

4. 收集含有基因组DNA的洗脱液，-20℃保存备用

七、注意事项

• 酵母细胞壁较厚，建议充分进行溶壁酶处理以确保完全破壁

• 操作过程要严格保证无核酸酶污染，建议使用无菌低吸附滤芯枪头和离心管

• 所有的离心步骤均在室温完成

• 裂解液如产生沉淀，可室温放置或37℃水浴溶解后使用

• 菌体浓度检测一般OD600值为1时，酿酒酵母细胞为1-2×10⁷cells/mL

• 本产品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗

八、储存条件与有效期

• 保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下密封保存

• 运输条件：常温运输

• 有效期：12个月（自生产日期起）

九、订购信息

本产品现货供应，提供50次、100次等多种规格，无菌无酶灌装，有效避免交叉污染。提供正规科研用途发票，支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、微生物研究所、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。

富沃克生物 —— 专注生命科学工具，以高效柱式酵母DNA提取方案赋能微生物研究与分子检测的每一个环节。

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