产品分类
Product Category相关文章
Related Articles详细介绍
酵母基因组提取纯化试剂盒(柱式法)
离心柱型|酵母DNA提取|真菌核酸纯化|科研试剂|含正规发票
别名:柱式酵母DNA提取试剂盒、酵母基因组DNA快速提取试剂盒
一、产品概述
富沃克生物推出的酵母基因组提取纯化试剂盒(柱式法)是一款专为酵母分子生物学研究设计的高品质基因组DNA纯化产品。本产品采用特异性结合DNA的硅胶膜离心柱与优化的裂解结合体系,配合溶壁酶(Lyticase)与蛋白酶K双重消化,可高效裂解酵母细胞壁,有效去除多糖、蛋白及PCR抑制物,获得高纯度基因组DNA。
在酵母分子生物学研究中,高质量基因组DNA的获取是菌种鉴定、基因功能研究、遗传转化验证及工业菌株改造的基础。然而,酵母细胞壁结构致密、成分复杂——酿酒酵母细胞壁主要由葡聚糖(约占30-40%)、甘露聚糖(约占30-40%)和几丁质(约占1-3%)构成,三者相互交联形成坚韧的三维网状结构。普通裂解液无法直接穿透如此致密的细胞壁。传统的酵母DNA提取方法(如蜗牛酶法、液氮研磨法)操作繁琐、耗时长,且需要使用有毒有机试剂。
本产品正是针对酵母样本提取的这一核心痛点而开发——将溶壁酶酶解破壁、蛋白酶K消化与硅胶膜离心柱纯化技术相结合。溶壁酶可特异性水解酵母细胞壁中的β-1,3-葡聚糖等多糖成分,使细胞壁结构变得疏松;蛋白酶K在优化的裂解体系中高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。两者协同作用,实现酵母细胞壁的彻底破碎和核酸的高效释放。配合优化的结合液与洗涤缓冲液,可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物,获得高纯度、高完整性的酵母基因组DNA。
产品适用于酵母培养物、菌液、发酵液、菌落及含酵母样本中DNA的提取纯化,提取产物OD260/280比值1.7-1.9,可直接用于PCR、qPCR、18S rDNA测序、酶切分析及分子鉴定等下游实验。
柱式法操作安全无毒,无需酚氯仿抽提,操作流程标准化,30-60分钟即可完成。无菌无酶灌装,有效避免交叉污染,提供正规发票,现货供应,欢迎分子生物学实验室、微生物所及科研单位老师选购。
二、技术原理
本试剂盒基于硅胶膜离心柱核酸分离技术,结合优化的裂解体系,实现对酵母基因组DNA的高效提取与纯化。
高效裂解与核酸释放:酵母细胞壁结构致密、成分复杂,是核酸释放的主要屏障。本试剂盒采用溶壁酶(Lyticase)对酵母细胞进行酶解处理。溶壁酶能够特异性水解酵母细胞壁中的β-1,3-葡聚糖等成分,使细胞壁结构变得疏松。随后,独特的结合液与蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶。蛋白酶K在变性剂中依然能保持高活性,高效降解与核酸结合的蛋白质及其他杂质。三者协同作用,使基因组DNA从核蛋白复合物中充分释放到溶液中。
离心柱的特异性吸附:样品裂解后,DNA被释放到溶液中。在高离序盐状态下,将裂解产物转移至硅胶膜离心柱中,硅基质膜材料可高效、专一地吸附DNA分子。其原理为:在高盐和低pH条件下,阳离子桥能够中和DNA与硅醇基团之间的表面负电荷,使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面;而蛋白质、多糖及其他杂质则不被吸附。离心吸附柱中采用的硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
杂质的彻底去除:DNA被吸附于硅胶膜上后,通过抑制物去除液和漂洗液的多次离心洗涤,可有效去除残留的多糖、蛋白质、盐离子及其他PCR抑制物。多次柱漂洗确保高纯度。
高纯度DNA的洗脱:洗涤完成后,在低盐、高pH值条件下,DNA从硅胶膜上被高效洗脱下来。所得即为高纯度、高完整性的酵母基因组DNA,OD260/280比值一般在1.7-1.9之间,片段大小可达20-50Kb,可直接用于下游分子生物学实验。
三、核心优势
1. 溶壁酶与蛋白酶K双重裂解,裂解高效
采用溶壁酶与蛋白酶K双重裂解体系,溶壁酶可特异性水解酵母细胞壁中的β-1,3-葡聚糖等多糖成分,配合蛋白酶K高效降解蛋白质。两者协同作用,实现酵母细胞壁的彻底破碎和核酸的高效释放。部分产品已包含溶壁酶,无需另外购买破壁酶。
2. 纯度高,有效去除多糖和蛋白
优化的裂解和洗涤体系可有效去除多糖、蛋白质及其他PCR抑制物。提取的基因组DNA纯度高,OD260/280比值一般在1.7-1.9之间,片段大小可达20-50Kb。可直接用于对质量要求苛刻的下游实验。
3. 柱式法操作,安全无毒
全程无需使用苯酚、氯仿等有毒有机试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。对实验人员和环境更加友好安全。
4. 操作快速简便,30-60分钟完成
操作流程标准化,单个样品裂解后操作一般可在30分钟内完成。离心吸附柱内硅基质膜采用特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好,不会发生离心柱堵塞现象。
5. 得率高,满足实验需求
约3mL处于指数生长期的酵母培养液一般一次抽提可纯化出10-15μg的高质量基因组DNA;从2mL酵母菌液中也可获得5-10μg DNA。提取的DNA可直接用于下游多种实验。
6. 下游应用广泛
提取的基因组DNA纯度高、完整性好,可直接用于PCR、qPCR、18S rDNA测序、酶切分析、Southern blot、文库构建及分子鉴定等多种下游实验。
四、技术参数
五、主要应用场景
| 应用领域 | 具体用途 |
|---|---|
| 酵母菌种鉴定 | 18S rDNA/ITS区段扩增与测序、分子系统发育分析 |
| 基因功能研究 | 酵母基因的PCR扩增、克隆与表达分析 |
| 遗传转化验证 | 转化子中目标基因的PCR鉴定 |
| 工业菌株改造 | 酿酒酵母、毕赤酵母等工业菌株的基因型鉴定 |
| 发酵工程质控 | 发酵液中酵母菌株的分子生物学检测 |
| Southern blot | DNA杂交分析 |
| 文库构建 | 基因组文库构建 |
| 酶切分析 | 限制性内切酶消化分析 |
六、使用说明
操作前准备:
标准操作流程:
(一)样本预处理与破壁
(二)细胞裂解与核酸释放
(三)DNA结合
(四)洗涤
(五)洗脱
七、注意事项
酵母细胞壁较厚,建议充分进行溶壁酶处理以确保完全破壁
操作过程要严格保证无核酸酶污染,建议使用无菌低吸附滤芯枪头和离心管
裂解液如产生沉淀,可室温放置或37℃水浴溶解后使用
本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗
八、储存条件与有效期
九、订购信息
本产品现货供应,提供50次、100次等多种规格,无菌无酶灌装,有效避免交叉污染。提供正规科研用途发票,支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、微生物研究所、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。
富沃克生物 —— 专注生命科学工具,以高效柱式酵母DNA提取方案赋能微生物研究与分子检测的每一个环节。
淘宝购买链接:酵母基因组提取纯化试剂盒柱式法 科研试剂 可免费开发票 FWKNE
联系咨询淘宝客服,留言官网,有内部优惠价哦
厂家联系微信号(同手机号):19850855600
或扫二维码添加微信,可免费领取试用装(包邮):

产品咨询
电话
微信扫一扫