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通用型离心柱式基因组DNA纯化系统|动物组织/培养细胞/鼠尾/细菌/酵母通用|含RNase A高效去除RNA|科研专用
别名:柱式DNA提取试剂盒、离心柱法基因组DNA提取试剂盒、通用型柱式基因组DNA纯化试剂盒
一、产品概述
本试剂盒是富沃克生物专为生命科学研究领域开发的一款通用型基因组DNA纯化产品,采用硅胶膜离心柱与优化的裂解结合体系,配合蛋白酶K消化,可高效从动物组织(肝、肾、脑、肌肉、鼠尾等)、培养细胞、细菌、酵母及全血样本中提取高纯度基因组DNA。试剂盒内置RNase A,可在提取过程中有效去除RNA污染,提取产物OD260/280比值1.7-1.9,DNA片段长度可达30-50 kb,完整性优越,可直接用于PCR、qPCR、Southern Blot、酶切分析、文库构建及测序等下游实验。
柱式法操作安全无毒,全程无需苯酚、氯仿等有毒有机试剂抽提,也无需耗时的醇类沉淀。操作流程标准化,样品裂解后仅需约15-30分钟即可完成提取。本产品适配标准台式离心机,无需特殊设备,适合各类分子生物学实验室日常使用。
二、技术原理
本试剂盒基于经典的硅胶膜离心柱核酸分离技术。硅胶膜表面的硅醇基团呈弱酸性,水化后带负电。在高盐和低pH条件下,溶液中存在的阳离子形成阳离子桥,中和DNA与硅醇基团之间的表面负电荷,使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面;而蛋白质、多糖及其他代谢产物不被吸附而被洗涤去除。随后在低盐或水溶液状态下,硅胶膜的硅醇基团与DNA磷酸基团之间产生静电排斥,DNA从硅胶膜上解吸附并被洗脱下来,从而获得纯化。
具体操作流程为:样品首先经蛋白酶K消化裂解,释放细胞核内的基因组DNA;加入结合缓冲液调整结合条件后,将裂解液转移至离心柱;经高速离心,DNA在穿过硅胶膜的瞬间被特异性吸附;随后通过两次洗涤步骤去除蛋白质、脂质、多糖及其他PCR抑制物;RNase A同时作用去除残留RNA;最后用低盐洗脱缓冲液将纯净的基因组DNA从硅胶膜上洗脱下来。
三、产品优势
1. 高纯度与高得率:采用优质硅基质膜材料和独特的缓冲液系统,高效、专一吸附DNA,最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取产物OD260/280比值稳定在1.7-1.9,纯度优异。单个纯化柱最大可吸附30 μg基因组DNA。
2. 大片段DNA完整性好:提取的基因组DNA长度可达30-50 kb,同时100 bp的DNA片段也能有效回收。完整的大片段DNA对于Southern Blot、基因组文库构建等下游应用至关重要。
3. 有效去除RNA污染:内置RNase A,可在提取过程中彻底去除RNA,确保下游qPCR、测序等实验数据的准确性,避免RNA干扰导致的定量偏差。
4. 广泛的样本兼容性:经验证,适用于多种样本类型,包括哺乳动物组织(肝、肾、脑、肌肉、心脏、肺、脾等)、鼠尾(0.5-1 cm)、培养细胞(少至数百个细胞,多至500万个)、细菌(多达20亿个)、酵母(多达5000万个)以及全血样本。一个试剂盒通过说明书中提供的不同操作方法,即可抽提除植物样品外的几乎所有样品中的总DNA。
5. 操作简便快速:柱式法操作流程标准化,无需机械破碎。样品裂解后仅需约15-30分钟即可完成提取,大幅缩短实验周期。整个操作无需苯酚/氯仿抽提,无需醇类沉淀,安全无毒。
6. 下游应用无忧:提取的基因组DNA纯度高、片段完整,可直接用于PCR、Real-Time PCR、限制性酶切分析、Southern Blot、文库构建、测序、RAPD及分子标记等下游实验。
四、试剂盒组分与规格
本试剂盒包含裂解液、蛋白酶K、RNase A、洗涤液、洗脱液、离心柱及收集管等全套组分。提供以下规格选项:
50次规格:适配常规实验通量需求
100次规格:适配中高通量实验需求
全组分无菌无酶灌装,确保无DNase/RNase污染。
五、储存与运输条件
蛋白酶K及RNase A:需-20℃冷冻保存
六、订购信息
本产品现货供应,欢迎分子生物学实验室及科研单位老师咨询选购。富沃克生物提供专业技术支持与售后服务,助力您的科研工作高效推进。
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