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10× TBE缓冲液 | Tris-硼酸-EDTA缓冲液 | 核酸电泳专用 | 浓缩液
别名:10倍TBE电泳缓冲液、Tris-Borate-EDTA母液、TBE浓缩液
一、产品概述
富沃克生物推出的10× TBE缓冲液是一款高品质的分子生物学级核酸电泳浓缩液。本产品采用高纯Tris碱、硼酸和EDTA为原料,在洁净环境中精准配制,1×工作液含89mM Tris-硼酸、2mM EDTA,浓度准确、缓冲能力强、分辨率高。产品经0.22μm过滤除菌,经严格检测无DNase/RNase活性,适用于DNA/RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、琼脂糖凝胶电泳、DNA测序凝胶及小片段核酸(<1.5kb)分离。以超纯水为基质,使用前需用超纯水稀释10倍至1×工作液。室温保存,低温保存如有沉淀析出,37℃水浴溶解后不影响使用。产品现货供应,欢迎分子生物学实验室及科研单位老师选购。
TBE(Tris-Borate-EDTA)缓冲液是生物学中常用的核酸电泳缓冲盐溶液。其主要成分是Tris-硼酸盐与EDTA,具有缓冲能力强、分辨率高的特点,特别适合较长时间电泳和小片段核酸的分离。作为10倍浓缩的储备液,本产品为实验室提供了极大的便利——用户可根据实验需求灵活配制不同体积的工作液,避免了频繁配制带来的批次间差异和原料浪费。
二、技术原理
电泳缓冲液的双重作用:在核酸电泳过程中,缓冲液承担着两个核心功能。第一,维持合适的pH值。电泳时正极与负极都会发生电解反应——正极发生氧化反应(4OH⁻ - 4e⁻ → 2H₂O + O₂),负极发生还原反应(4H⁺ + 4e⁻ → 2H₂)。长时间的电泳会使正极变酸、负极变碱,而一个优秀的缓冲系统应具备足够的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本稳定。第二,提供适宜的导电性以利于DNA分子的迁移。一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的离子,浓度太低时电泳速度变慢,太高时则会因电流过大导致凝胶发热甚至熔化。
EDTA的核酸保护作用:EDTA是TBE缓冲液的重要组分之一,加入浓度为1-2mmol/L。其核心功能是螯合Mg²⁺等二价阳离子,防止电泳时激活DNA酶导致核酸降解,同时还可防止Mg²⁺离子与核酸生成沉淀。这一保护机制对于保持核酸样品的完整性至关重要。
TBE的缓冲能力优势:TBE的缓冲能力强于TAE。在长时间电泳(如过夜电泳)时,TBE是优于TAE的选择——TAE缓冲容量小,长时间电泳不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。TBE缓冲液可反复使用多次,在保证分离效果的同时降低了试剂成本。
硼酸对后续实验的影响:TBE缓冲液中的硼酸成分会影响DNA回收效率以及后续的酶反应。硼酸是许多酶的强效抑制剂,因此若要进行DNA片段的琼脂糖凝胶电泳回收实验或后续需要进行酶切、连接等酶学操作的实验,建议使用TAE缓冲液。
三、核心优势
1. 缓冲能力强,适合长时间电泳:TBE的缓冲能力优于TAE,特别适合需要长时间运行的电泳实验(如过夜电泳)。即使在长时间电泳过程中,也能维持溶液两极pH的稳定,保证核酸片段的稳定分离。
2. 分辨率高,小片段分离效果优异:TBE缓冲液电泳小于1kb的片段时分离效果更好。特别适合DNA短片段(<1.5kb)的电泳分析。对于分辨率要求较高的实验,较高浓度的凝胶配合TBE缓冲液有利于提高小分子量核酸的分辨率。
3. 适用范围广泛:TBE既可用于非变性凝胶,也可用于变性凝胶(含7M尿素)。广泛应用于DNA自动测序凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳及琼脂糖凝胶电泳。既可用作电泳运行缓冲液,也可用作凝胶配制缓冲液。
4. EDTA保护核酸完整性:含有的EDTA可螯合二价阳离子,有效抑制DNase活性,防止PCR扩增产物在电泳过程中被降解。保障核酸样品的完整性和电泳结果的可靠性。
5. 10×浓缩液,使用灵活经济:10倍浓缩设计,用户可根据实验需要稀释至1×或0.5×工作液使用。一瓶可配制大量工作液,经济实惠,储存占用空间小。由于TBE缓冲能力较强,常用0.5×即可满足大部分实验需求。
6. 无菌无酶,品质可靠:经0.22μm过滤除菌,经检测无DNase/RNase活性。确保电泳过程中不会引入外源性核酸酶导致样品降解,保障实验结果的准确性。
7. 高纯度原料,批次稳定:采用高纯Tris碱、硼酸和EDTA为原料,以超纯水为基质配制。每批次均经过严格的质量控制,确保浓度准确、pH稳定、批次间一致。
四、技术参数
| 参数项目 | 规格说明 |
|---|---|
| 产品名称 | 10× TBE缓冲液 / Tris-硼酸-EDTA缓冲液 |
| 浓缩倍数 | 10× |
| 1×工作液成分 | 89mM Tris-硼酸,2mM EDTA |
| 0.5×工作液成分 | 45mM Tris-硼酸,1mM EDTA |
| pH值(25℃) | 8.3±0.1 |
| 外观 | 无色透明液体 |
| 灭菌方式 | 0.22μm过滤除菌 |
| 核酸酶检测 | 无DNase/RNase活性 |
| 保存条件 | 室温保存 |
| 有效期 | 1-2年 |
| 包装规格 | 500mL / 1L / 等多种规格 |
五、TBE与TAE缓冲液的选择指南
| 特性 | TBE缓冲液 | TAE缓冲液 |
|---|---|---|
| 缓冲容量 | 大,适合长时间电泳 | 小,不适合长时间电泳 |
| 小片段分离(<1kb) | 效果更佳 | 效果一般 |
| 大片段分离(>13kb) | 效果一般 | 效果更佳 |
| DNA回收效率 | 低(硼酸干扰) | 高 |
| 后续酶反应 | 硼酸抑制酶活性 | 兼容性好 |
| 超螺旋DNA | 分子量偏大 | 更符合实际分子量 |
| 可重复使用 | 可多次使用 | 不建议重复使用 |
选择建议:对于小片段DNA(<1.5kb)的电泳、DNA测序凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳以及需要长时间电泳的实验,推荐使用TBE缓冲液;对于需要进行DNA回收和后续酶切、连接等酶学操作的实验,推荐使用TAE缓冲液。
六、主要应用场景
| 应用领域 | 具体用途 |
|---|---|
| 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | DNA和RNA的非变性或变性(7M尿素)聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
| DNA自动测序 | 测序凝胶的电泳分离 |
| 琼脂糖凝胶电泳 | DNA短片段(<1.5kb)的琼脂糖凝胶电泳分离 |
| 小片段核酸分析 | <1kb核酸片段的精细分离 |
| 凝胶配制 | 作为琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶的配制缓冲液 |
| RNA电泳 | RNA样品的电泳分析 |
七、使用说明
工作液配制:
1×工作液:取适量10×TBE浓缩液,用超纯水按1:10比例稀释(例如:100mL 10×TBE + 900mL 超纯水 = 1L 1×工作液),充分混匀后即可使用。
0.5×工作液:取适量10×TBE浓缩液,用超纯水按1:20比例稀释(例如:50mL 10×TBE + 950mL 超纯水 = 1L 0.5×工作液)。由于TBE缓冲能力较强,常用0.5×即可满足大部分电泳需求。
琼脂糖凝胶配制:用1×或0.5×TBE工作液配制琼脂糖凝胶,加热溶解后倒入制胶模具,插入梳子,待凝固后使用。
电泳运行:将配好的TBE工作液倒入电泳槽中,将凝胶放入电泳槽,确保凝胶完全浸没在缓冲液中,上样后接通电源进行电泳。
注意事项:
八、注意事项
本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗
九、储存条件与有效期
十、订购信息
本产品现货供应,提供500mL、1L等多种规格,无菌过滤,即开即用,支持批量采购。欢迎各分子生物学实验室、科研院所、医疗机构及生物医药企业来电来函咨询选购。富沃克生物提供专业的技术支持与售后服务。
富沃克生物 —— 专注生命科学工具,以高品质电泳缓冲液赋能核酸分析与分子生物学研究的每一个环节。
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