做核酸电泳的朋友都知道,跑小片段DNA或者做聚丙烯酰胺凝胶电泳时,TBE是绕不开的“老搭档”。今天整理一份10× TBE的简明指南,配方、配制要点、适用场景一次说清。
TBE全称是Tris-硼酸-EDTA缓冲液(Tris-borate-EDTA)。先配成10倍的浓缩液,用的时候稀释10倍就行——省空间、防污染。
TBE的核心优势是缓冲能力强,适合较长时间的电泳,对小片段DNA(尤其是小于1 kb的核酸)分离效果更好,分辨率高。不过,TBE中的硼酸会抑制DNA回收效率和后续酶反应,所以做切胶回收实验时,建议改用TAE。
我综合了百度百科、protocols.io(剑桥大学) 、Kerr Lab以及Sigma-Aldrich等多份来源,整理出以下“多方交叉验证”的10× TBE配方表:
组分 | 用量(配制1 L 10×) | 1×工作液终浓度 |
Tris碱 | 108 g | 89 mM |
硼酸 | 55 g | 89 mM |
0.5 M EDTA(pH 8.0) | 40 mL | 2 mM |
注意:如果用固体Na₂EDTA·2H₂O代替EDTA母液,需称取7.44 g。建议直接使用预配好的0.5 M EDTA母液(pH 8.0),溶解更省心。
配制步骤:[1]
1. 称取108 g Tris碱和55 g硼酸于1 L烧杯中。
2. 加入约600 mL去离子水,磁力搅拌至完全溶解(硼酸溶解较慢,建议搅拌30–60分钟;如需加速溶解,可于室温下加热搅拌至不超过50°C)。待溶液澄清后再进行下一步。
3. 加入40 mL 0.5 M EDTA母液(pH 8.0) ,继续搅拌混匀。
4. 用去离子水定容至1 L,盖好瓶盖充分颠倒混匀10–15次,室温保存即可。建议分装成小体积(如100 mL/瓶)保存,避免反复开盖引入污染。
关键提醒:
1. 10× TBE不需要调pH。[2]配好后1×工作液的pH自然在8.2–8.4之间。
2. 稀释成1×工作液:取100 mL 10× TBE,加去离子水定容至1 L。
3. 做琼脂糖凝胶电泳时,也常用0.5× TBE(50 mL 10× TBE + 950 mL水)。
4. 10× TBE不稳定,容易产生沉淀。建议现配现用,或分装后室温避光保存,不宜超过6个月。若长期存放后出现白色沉淀,属硼酸析出的正常现象,使用前37°C水浴加热并摇匀即可完全溶解,不影响使用效果。
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产品信息:
产品名称 | 规格 | 产品货号 |
10XTBE缓冲液 | 100 ml/500ml | ZMH616-02 |
产品有试用装免费包邮(部分产品),详询微信/同手机:19850855600

[1] Kerr Lab. TBE Electrophoresis Buffer. University of Texas at Austin, 2012
[2] mowohnadine, Molloy J. Preparing 10x TBE Electrophoresis buffer. protocols.io, 2022. doi:10.17504/protocols.io.j8nlkkok5l5r/v1
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