实验必备｜0.5 M EDTA 配制全指南：解锁螯合试剂的正确打开方式

在分子生物学与蛋白研究实验中，0.5 M EDTA（乙二胺四乙酸）是最常用的金属离子螯合试剂之一，应用场景广泛，尤其在PCR扩增、蛋白电泳、质粒提取、蛋白纯化等实验中发挥着关键作用。其核心功能是稳定抑制核酸酶、蛋白酶的活性，避免核酸（DNA/RNA）或蛋白质因酶解发生降解，从而保障实验样品的完整性与实验结果的准确性。

0.5 M EDTA的核心价值源于其强大的金属离子螯合能力，具体原理简洁解析如下：EDTA分子可与溶液中Mg²⁺、Ca²⁺等二价金属离子形成稳定的环状螯合物，且结合能力极强。而核酸酶（如DNase、RNase）、蛋白酶的活性，均高度依赖Mg²⁺、Ca²⁺等二价金属离子作为辅助因子——这些金属离子可维持酶的空间构象，保障酶活性中心的正常功能。

当EDTA螯合溶液中的二价金属离子后，核酸酶、蛋白酶会因失去必需的辅助因子，导致空间构象破坏、活性中心失活，进而无法发挥降解作用。这种抑制作用温和且特异性强，仅针对依赖二价金属离子的酶类，不影响核酸、蛋白质本身的天然构象与活性，可广泛适配各类分子生物学与蛋白研究实验，是守护实验样品完整性的关键试剂。

以下是0.5 M EDTA（1 L 装）的配置方法

0.5M EDTA (1L).pdf

⚠️关键注意事项

1. pH 是溶解关键：EDTA 在 pH < 7.0 时几乎不溶，只有将 pH 调至 8.0 才能完全解离溶解。若搅拌后仍有沉淀，需继续用 NaOH 调节 pH。

2. 结晶处理：若溶液出现结晶，只需将其置于 37°C 水浴中加热，结晶即可重新溶解，冷却后不影响使用。

3. 分装建议：建议将配好的溶液分装成 50 ml / 管的小份，避免反复冻融导致浓度不均。

4. 操作防护：NaOH 具有强腐蚀性，配制时需佩戴手套和护目镜，避免直接接触皮肤和眼睛。

售后与福利：

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