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实验室里的 “核酸守护者”:3 M 醋酸钠配制全攻略

发布时间:2026-01-29      点击次数:27

在分子生物学实验中,3 M 醋酸钠是核酸沉淀的核心试剂之一,尤其在质粒提取、RNA 纯化、基因组 DNA 分离等场景中不可或缺。核酸(DNA/RNA)在水溶液中易溶解,而 3 M 醋酸钠可通过构建高盐环境,显著降低核酸的溶解度,促使其从溶液中高效、快速聚集沉淀,同时能最大限度保留核酸的完整性,提升回收效率,是守护核酸纯度与回收率的关键角色。

3 M 醋酸钠的核心作用的源于其高浓度组分特性及精准调控的 pH 值,具体原理简洁解析如下:其核心作用来自高浓度的醋酸根离子(CH₃COO⁻)与钠离子(Na⁺),两者协同发挥作用:钠离子可中和核酸分子表面的负电荷,打破核酸与水分子之间的静电相互作用;醋酸根离子则能破坏核酸表面的水合层,使核酸分子失去水化保护,进而相互聚集、析出沉淀,实现核酸与杂质(如蛋白质、小分子盐类)的初步分离。

尤为关键的是,3 M 醋酸钠需精准调节 pH 值至 5.2,这一 pH 条件是提升核酸纯化特异性的核心:该 pH 可特异性适配 DNA 的沉淀需求,在促使 DNA 高效沉淀的同时,能有效减少 RNA 的共沉淀,避免 RNA 污染影响后续实验(如质粒酶切、PCR 扩增);同时,pH 5.2 可维持核酸的天然构象,防止其因酸碱失衡发生降解,进一步保障核酸的完整性与活性。


  

以下是3 M 醋酸钠的配置方法

3 M(100ml) 醋酸钠.pdf


实验关键注意事项:

1. pH 精准控制:pH 5.2 是沉淀 DNA 的最佳条件,若 pH 偏高易导致 RNA 共沉淀,影响核酸纯度;若 pH 偏低则会降低 DNA 沉淀效率,需严格校准。


2. 沉淀处理:低温储存时醋酸钠易结晶析出,只需将溶液置于室温或 37℃ 水浴中温和加热,沉淀即可完全溶解,不影响后续使用。


3. 灭菌规范:必须进行高温高压灭菌以去除微生物污染,避免对核酸实验造成干扰;灭菌后的溶液在室温下可稳定保存 6–12 个月。


4. 操作提示:冰醋酸具有挥发性与刺激性,调节 pH 时建议在通风橱内操作,并佩戴手套与护目镜,避免直接接触皮肤与呼吸道。


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