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菌株培养“营养餐”:NZCYM培养基规范配制

发布时间:2026-01-29      点击次数:15

在分子生物学实验中,NZCYM培养基是一种营养丰富、适配性广的复合培养基,被誉为菌株培养的“全能营养餐”。其核心功能是为原核菌株(尤其是大肠杆菌)的快速生长、增殖提供充足且均衡的营养物质,广泛适配质粒扩增、重组菌株培养、噬菌体增殖、蛋白表达前种子液培养等实验场景。作为实验室常用的高营养培养基,NZCYM培养基的组分纯度、配制准确性、pH调节精度及灭菌规范,直接影响菌株的生长速度、密度及活性,是保障后续质粒提取、蛋白表达等实验顺利开展的核心基础。

NZCYM培养基的核心优势的在于营养全面且配比科学,各组分协同作用,精准满足菌株生长需求:酵母提取物(Yeast Extract)提供丰富的氨基酸、维生素、生长因子及核酸衍生物,为菌株代谢提供核心营养支撑;酪蛋白氨基酸(Casamino Acid)是小分子肽段与游离氨基酸的混合物,易被菌株吸收利用,补充生长所需的氮源;NZ胺(NZ Amine)作为优质氮源,进一步丰富氨基酸种类,促进菌株快速增殖;氯化钠(NaCl)维持培养基渗透压平衡,避免菌株因渗透压失衡受损;七水硫酸镁(MgSO₄·7H₂O)提供镁离子,作为菌株代谢过程中多种酶的激活剂,同时辅助维持细胞膜稳定性,提升菌株活性。

NZCYM培养基营养浓度高于普通LB培养基,更适合营养需求较高的菌株培养,或需要快速获得高浓度菌液的实验场景。其配制核心要点在于严格控制各组分用量、精准调节pH值、规范执行高温高压灭菌流程,同时重点关注各易吸潮、易风化组分的称量与保存,确保培养基营养均衡、无菌无杂,为菌株生长提供最优环境。


NZCYM培养基(1 L 装)精准配方如下:

NZCYM培养基(1 L 装)精准配方.pdf


⚠️ 实验关键注意事项:

1.  试剂称量规范:Yeast Extract易吸潮结块,Casamino Acid、NZ胺易吸潮且纯度敏感,MgSO₄·7H₂O易风化,称量时需快速高效,避免试剂长时间暴露在空气中;称量后立即密封各试剂瓶,确保用量精准,防止试剂吸潮、风化影响溶解效率与培养基营养纯度,若试剂出现结块、变色等现象,需更换新试剂后再进行配制。

2.  pH调节要点:pH调节选用5N NaOH(浓度较高),需极缓慢滴加并持续搅拌,避免局部碱性过强破坏培养基中的营养成分;调节过程中需反复用pH计监测,确保pH值精准至7.0;灭菌后培养基pH值可能出现轻微偏移(≤±0.1),属于正常现象,不可二次调节pH,避免引入杂菌污染培养基。

3.  分装与灭菌规范:分装容器需选用耐高温高压、洁净无菌的试剂瓶,避免使用破损、有裂纹的容器;灭菌前瓶盖无需完全密封,留少量缝隙便于灭菌时排出蒸汽,防止容器因压力过高变形;灭菌过程中需严格遵循灭菌参数,确保灭菌彻底,灭菌不彻底会导致杂菌滋生,影响菌株生长。

4.  冷却与保存规范:灭菌完成后,需待灭菌锅压力降至常压、温度降至室温后再打开锅盖,避免高温高压导致培养基飞溅、容器炸裂;冷却过程中,待培养基温度降至50℃左右时,可将瓶盖拧紧密封,避免冷却时容器内形成负压导致变形,同时减少杂菌污染风险;4℃冷藏保存时,需密封良好,避免与其他试剂交叉污染,保存期限不超过1个月,若发现培养基出现浑浊、沉淀、异味等现象,表明已污染,需丢弃重配。

5.  其他注意事项:配制过程中,所有实验用品需保持干净无杂质,避免引入杂菌或有害物质;搅拌过程中避免搅拌子碰撞烧杯内壁,防止烧杯破损;定容时需在室温下进行,避免温度变化导致溶液体积偏差;使用后的实验器皿需及时清洗晾干,妥善存放,便于后续重复使用。


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