质粒筛选“守护者”：常用抗生素贮存液规范配制

在分子生物学实验中，抗生素贮存液是质粒筛选、重组菌株培养、阳性克隆鉴定的核心辅助试剂，被誉为质粒筛选的“精准守护者”。其核心功能是通过特异性抑制杂菌生长，筛选出含有抗性基因的重组菌株或质粒转化菌株，确保实验获得纯净的目标菌株，广泛适配质粒扩增、蛋白表达、基因克隆等各类原核生物实验场景。抗生素贮存液的配制纯度、浓度准确性、除菌规范及保存条件，直接影响筛选效果与菌株活性，是保障实验重复性与可靠性的关键环节。

实验室常用抗生素贮存液因抗生素种类不同，其溶剂选择、配制要求及除菌方式存在显著差异，核心分为水溶性与醇溶性两大类：氨苄青霉素、羧苄青霉素、卡那霉素、链霉素易溶于无菌去离子水，需通过过滤除菌保障无菌性；氯霉素、四环素难溶于水，需以无水乙醇为溶剂，利用乙醇的抑菌作用无需额外除菌。各类抗生素贮存液均需严格控制终浓度，小份分装并避光冷冻保存，避免反复冻融导致抗生素活性下降，确保后续工作液稀释后能达到精准的筛选浓度。

抗生素贮存液的配制核心要点是“分类处理、精准控浓、规范除菌、避光保存”：根据抗生素溶解性选择对应溶剂，精准称量确保终浓度无误，水溶性抗生素严格执行过滤除菌，所有贮存液小份分装并避光-20℃保存，同时结合各类抗生素的特性关注特殊注意事项，才能保障贮存液活性稳定，为质粒筛选实验提供可靠支撑。

常用抗生素贮存液精准配方

常用抗生素贮存液精准配方.pdf

⚠️ 实验关键注意事项

1.  溶剂选择：水溶性抗生素用无菌去离子水，醇溶性用无水乙醇，严禁混淆；溶剂需高纯度，避免杂质影响活性。

2.  除菌操作：水溶性抗生素需用0.22μm滤器过滤除菌（滤器需完好）；醇溶性无需除菌，不可额外过滤。

3.  分装保存：均需棕色冻存管+铝箔纸避光，1–5ml/份分装，-20℃冷冻保存；严禁反复冻融，有效期3–6个月，失效即丢弃。

4.  特殊注意：四环素筛选需用无镁盐培养基；实验周期长可选用羧苄青霉素替代氨苄青霉素。

5.  安全废液：佩戴防护用品，避免直接接触抗生素；废液、废弃物需分类收集，交由专业机构处理，严禁随意丢弃。

6.  其他：抗生素粉末称量需快速密封；水溶性在超净台操作，醇溶性在通风处操作且远离火源；工作液现配现用。

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