做PCR的朋友应该都体会过那种绝望——跑出来的条带莫名其妙,阴性对照出了阳性,辛辛苦苦几周的数据全废了。罪魁祸首往往就是核酸污染。酒精仅使核酸沉淀,挥发后残留核酸复溶回表面并恢复模板活性;紫外照射对边角无能为力,对短片段效果也差;高温高压又没法处理精密仪器。那到底有没有靠谱的解决方案?
核酸清除剂是一种专门降解DNA和RNA分子的喷雾型试剂,能在数分钟内将核酸片段彻底断链清除,从根源上杜绝PCR假阳性。[1]其核心原理是在表面活性剂、氧化剂等组分的联合作用下,将吸附在表面的核酸解离出来,再通过化学方式断链降解。
市面上核酸清除剂的配方虽有差异,但核心功能模块基本相同。下表整理了常见的配方成分及其作用:[2]
成分类别 | 常见原料 | 核心作用 | 参考配比 |
氧化剂 | 次氯酸钠、过氧化氢(选其一)、过氧化脲 | 产生活性氧自由基,破坏核酸的碱基结构与磷酸骨架 | 0.1%-10% |
表面活性剂 | SDS、Tween、十二烷基二甲基氧化胺 | 降低表面张力,将吸附的核酸从器材表面“拽”下来 | 1%-8% |
螯合剂 | EDTA、柠檬酸 | 螯合金属离子,抑制残留核酸酶活性,保护实验体系 | 1-15mM |
酸碱调节剂 | 氢氧化钠、有机酸 | 创造适宜降解的pH环境,辅助核酸变性 | 0.5%-1.0% |
溶剂 | 去离子水、乙醇 | 作为载体,保证各组分均匀分散 | 余量 |
配比仅供参考,不同场景需调整
以常见的氧化剂+表面活性剂体系为例:[3]
1. 配制碱性溶液:将氢氧化钠(0.5%-1.0%)溶于去离子水中,搅拌至完全溶解。
2. 加入表面活性剂:缓慢加入SDS或Tween(1%-8%),持续搅拌至溶解。
3. 加入螯合剂:加入EDTA溶液(终浓度1-15mM),混匀。
4. 最后加氧化剂:待溶液完全冷却至室温(<30℃)后,缓慢加入次氯酸钠或过氧化氢(0.1%-10%),室温搅拌至均匀。
5. 定容与分装:加去离子水定容,转入喷壶备用。
⚠️ 关键提醒:氧化剂一定要最后加,提前混合会失效;配好的溶液避光保存,次氯酸钠类开封后建议30天内用完;喷洒后静置5-10分钟再擦拭,给降解反应留足时间。
杭州富沃克生物科技有限公司推出的科研专用核酸污染清除剂,采用专用核酸降解配方,不含强酸强碱与腐蚀性残留,可快速降解双链DNA、单链DNA、RNA、质粒片段、扩增产物等各类核酸污染物,彻底破坏核酸碱基结构与扩增模板活性,3-10分钟即可完成清除。产品适配PCR仪、生物安全柜、移液器、离心管架等各类场景,省去自行配制的繁琐与风险。
产品名称 | 规格 | 产品货号 |
核酸清除剂 | 100ml/300ml/600ml | HSQ606-01 |
厂家联系微信号:19850855600
邮箱:support@fwkbio.com
官网链接:科研专用核酸污染清除剂 实验室气溶胶DNA/RNA污染清洁喷雾-杭州富沃克生物科技有限公司
[1] 青岛立见诊断技术发展中心. 一种核酸祛除剂: CN110684605B[P]. 2021-08-10.
[2] 思凝一云. 核酸清除剂 Nucleic Acid Cleaner[EB/OL]. 科创中国, 2023-11-09.
[3] 王占奎, 杨云华, 王敏, 等. 一种核酸、核酸酶污染清除剂及其制备方法和应用: CN118421404A[P]. 2024-08-02.
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