50×TAE缓冲液 – 50倍浓缩Tris-醋酸-EDTA电泳缓冲液（1L 配制）

50×TAE缓冲液 – 50倍浓缩Tris-醋酸-EDTA电泳缓冲液（1L 配制）

用途说明
用于DNA琼脂糖凝胶电泳中的缓冲体系及凝胶配制，是核酸电泳最常用的缓冲液之一。TAE对DNA片段回收效率高，尤其适用于需回收DNA片段的制备型电泳。

工作液组分浓度（50×）

• 2M Tris-醋酸

• 100mM EDTA

配制方法（1L 体系）

1. 称取242 g Tris碱，量取57.1 ml冰乙酸（冰醋酸），称取37.2 g Na₂-EDTA·2H₂O，置于1L烧杯中。

2. 加入约800ml去离子水，充分搅拌至完全溶解（EDTA溶解较慢，需充分搅拌）。

3. 室温下用冰乙酸或Tris碱将溶液pH精确调至8.3。

4. 转移至1L容量瓶，用去离子水定容至1L，颠倒混匀数次。

5. 室温保存，无需高压灭菌。使用时按1:50比例稀释（如20ml 50×TAE + 980ml去离子水 → 1×TAE工作液）。

关键操作要点

• pH温度依赖性：TAE缓冲液的pH随温度变化，必须室温下测定并调节pH，以保证1×工作液在电泳时pH准确。

• EDTA溶解助溶：Na₂-EDTA·2H₂O在中性或碱性条件下溶解度更高。若溶解困难，可滴加少量10M NaOH溶液助溶，待完全溶解后再调pH。

• 母液沉淀处理：50×母液长期储存或低温下可能出现沉淀（EDTA析出），使用前于37℃水浴加热并摇匀即可复溶，不影响电泳效果。

• 与TBE的选择：TAE缓冲容量较低，适合长时间电泳（需定期更换新鲜缓冲液）；但DNA片段回收率高，是胶回收实验的首选。