10×TBE缓冲液 – 10倍浓缩Tris-硼酸-EDTA电泳缓冲液（1L 配制）

10×TBE缓冲液 – 10倍浓缩Tris-硼酸-EDTA电泳缓冲液（1L 配制）

用途说明
用于DNA琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），是核酸电泳的经典缓冲液之一。TBE缓冲能力强，适合高电压、长时间电泳，尤其适用于小片段DNA的分离。

工作液组分浓度（10×）

• 100 mM Tris-硼酸

• 10 mM EDTA

配制方法（1L 体系）

1. 称取108 g Tris碱、55 g硼酸、7.44 g Na₂-EDTA·2H₂O，置于1L烧杯中。

2. 加入约800ml去离子水，充分搅拌至完全溶解（EDTA溶解较慢，需充分搅拌）。

3. 溶液pH应自然稳定在8.3左右，如需微调可用少量硼酸或Tris碱调节。

4. 转移至1L容量瓶，用去离子水定容至1L，颠倒混匀数次。

5. 室温保存，无需高压灭菌。使用时按1:10比例稀释（如100ml 10×TBE + 900ml去离子水 → 1×TBE工作液）。

关键操作要点

• EDTA助溶：Na₂-EDTA·2H₂O若溶解困难，可滴加少量10M NaOH溶液助溶，待完全溶解后再调pH。

• TBE vs TAE选择：

• TBE缓冲能力强，适合高电压、长时间电泳及小片段DNA（<1kb）分离。

• 注意：硼酸会抑制部分酶（如T4连接酶、某些限制酶）活性，因此需回收DNA进行酶切或连接的实验建议使用TAE缓冲液。

• 硼酸沉淀处理：长期储存或低温下可能出现硼酸结晶沉淀，使用前于37℃水浴加热并摇匀即可复溶，不影响电泳效果。

• 本溶液无需高压灭菌（硼酸不耐高温），配制时使用去离子水即可，长期保存不易长菌。