用途说明
用于琼脂糖凝胶中DNA/RNA的荧光染色。溴乙锭嵌入核酸双链碱基对之间,在紫外光照射下发出橙色荧光,是分子生物学中最经典的核酸凝胶染色试剂。
工作液浓度
10mg/ml 溴乙锭(储备液)
配制方法(100ml 体系)
称取1g 溴乙锭,置于100ml容器中(烧瓶或试剂瓶)。
加入100ml去离子水。
充分搅拌数小时直至完全溶解(溴乙锭溶解较慢,可于磁力搅拌器上长时间搅拌)。
将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。
工作浓度及使用方法
工作浓度:0.5μg/ml(琼脂糖凝胶中终浓度)。
使用方法:凝胶电泳结束后,将凝胶浸泡于含0.5μg/ml EB的TBE/TAE缓冲液中染色15~30分钟;亦可于凝胶配制时直接加入溴乙锭(每100ml凝胶加5μl 10mg/ml储备液)。
关键操作要点
强致癌性安全防护:溴乙锭是强致癌物质,操作全程必须在通风橱内进行,必须佩戴手套、实验服和护目镜。接触过EB的废弃物须按致癌物标准处理。
光敏感性:EB见光易分解,必须使用棕色瓶或用铝箔纸包裹容器避光保存,否则染色效率下降。
污染防控:建议使用专用区域及专用器具操作EB,避免交叉污染实验室其他区域。
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