DNA变性缓冲液 – Southern印迹核酸变性液（1L 配制）

DNA变性缓冲液 – Southern印迹核酸变性液（1L 配制）

用途说明
用于Southern blot印迹前琼脂糖凝胶中DNA片段的碱变性处理。NaOH使双链DNA解开为单链，便于后续转移到固相载体上；NaCl提供高离子强度，促进单链DNA与膜结合。

工作液组分浓度

• 1.5 M NaCl

• 0.5 M NaOH

配制方法（1L 体系）

1. 称取87.7g NaCl、20g NaOH，置于1L烧杯中。

2. 加入约800ml去离子水，充分搅拌至完全溶解。

3. 加去离子水定容至1L，充分混匀。

4. 室温保存。建议现配现用。

关键操作要点

• 强碱安全防护：NaOH具强腐蚀性，称量及操作须佩戴手套和护目镜。若不慎溅入眼睛或皮肤，立即用大量清水冲洗至少15分钟。

• CO₂影响：NaOH长期暴露于空气中会吸收CO₂生成碳酸钠，导致pH下降，变性效率降低。建议现配现用，不宜长期储存。

• 使用条件：Southern blot中通常将凝胶浸泡于本溶液中室温变性15～45分钟（视凝胶厚度而定）。