DNA杂交预杂交液/杂交液（碱性变性液）– 1L 配制

DNA杂交预杂交液/杂交液（碱性变性液）– 1L 配制

产品用途
本溶液为Southern blot等核酸印迹实验中的DNA碱性变性缓冲液，用于将琼脂糖凝胶中的双链DNA高效解开为单链，并利用高盐环境促进单链DNA与尼龙膜或硝酸纤维素膜的结合，是转膜前的关键处理试剂。

核心组分及终浓度

• 1.5 M 氯化钠（NaCl）

• 0.5 M 氢氧化钠（NaOH）

配制步骤（1L 总量）

1. 精确称取 87.7 g NaCl 和 20 g NaOH，置于1 L烧杯中。

2. 加入约 800 ml 去离子水，用磁力搅拌器充分搅拌直至完全溶解。

3. 用去离子水定容至 1 L，颠倒混匀数次。

4. 室温密封保存。因稳定性有限，推荐现配现用。

关键注意事项

• 强腐蚀性防护：NaOH有强烈腐蚀性，配制时必须佩戴耐化学腐蚀手套、护目镜及实验服，若皮肤或眼睛不慎接触，立即用大量清水冲洗至少15分钟。

• 避免CO₂影响：本液长期暴露于空气中会吸收CO₂生成碳酸盐，导致pH下降，变性效果显著降低，故应现配现用，不宜长期储存。

• 使用建议：Southern转膜前，将凝胶浸没于本溶液中，室温振荡孵育15～45分钟（视凝胶厚度调整），使DNA充分变性。