20×SSC – 20倍浓缩柠檬酸钠盐水缓冲液（1L 配制）

20×SSC – 20倍浓缩柠檬酸钠盐水缓冲液（1L 配制）

产品用途

20×SSC是分子生物学中最经典的高盐浓缩缓冲液母液，用于Southern blot、Northern blot、斑点杂交等核酸印迹实验中杂交液及洗涤液的配制。通过稀释至不同工作浓度（6×、2×、1×、0.5×等），精确调控核酸杂交的严谨性（stringency），有效洗除非特异性结合的探针，同时维持DNA/RNA双链的稳定性。本溶液可高温高压灭菌，是实验室必备的基础储备液。

核心组分及终浓度（20×）

• 3.0 M 氯化钠（NaCl）

• 0.3 M 柠檬酸钠（C₆H₅Na₃O₇·2H₂O）

• pH 7.0（25℃条件下测定）

配制方法（1L 体系）

1. 称取 175.3 g NaCl 和 88.2 g 柠檬酸钠·2H₂O（二水合物），置于1L烧杯中。

2. 加入约 800 ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解。

3. 滴加 14N HCl，调节pH至 7.0（室温下用pH计测定）。

4. 加去离子水定容至 1L，充分混匀。

5. 分装至适当容器，高温高压灭菌（121℃，20min）。

6. 灭菌后室温密封保存。

稀释参考速查表

关键操作要点

• 柠檬酸钠品型确认：柠檬酸钠有二水合物（分子量294.10）和无水物（分子量258.06）之分。上述配方基于最常用的二水合物。若使用无水物，精准称样量应为77.4 g（88.2 × 258.06/294.10），而非约64g，建议使用前务必核对试剂瓶标签上的分子量。

• 低温结晶处理：室温低于15℃时，20×SSC易析出白色片状结晶。使用前若发现结晶，于37℃水浴加热并间歇颠倒混匀至完全溶解（约30分钟），切勿剧烈震荡或加热超过40℃，以免柠檬酸盐分解。

• 灭菌与pH：先调pH至7.0后再灭菌，高温灭菌可能导致pH轻微下降（≤±0.1），一般不影响使用。若灭菌后pH变化较大，可用无菌1M NaOH或HCl微调。

• 防污染与保存：建议分装成无菌小瓶（如500ml/瓶），避免频繁开瓶引入微生物污染。室温避光保存，有效期建议6个月至1年，若出现浑浊或絮状沉淀应废弃重配。

如需其他配方（RNA杂交液、20×SSPE、Denhardt's等）的完整页面内容，请告知。