30%（W/V）Acrylamide – 29:1 丙烯酰胺/BIS制胶液（约1L 配制）

30%（W/V）Acrylamide – 29:1 丙烯酰胺/BIS制胶液（约1L 配制）

产品用途

本产品为聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的核心制胶原料，用于SDS-PAGE蛋白电泳、核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳及DNA测序凝胶等实验。丙烯酰胺（单体）与甲叉双丙烯酰胺（BIS，交联剂）在APS/TEMED催化下聚合形成具有分子筛效应的三维网状凝胶，依据分子量大小分离蛋白质或核酸片段。本配方采用29:1的单体/交联剂比例（丙烯酰胺:BIS = 29:1），是蛋白电泳最常用的经典配比。

核心组分及终浓度（30%）

• 29%（w/v）丙烯酰胺（Acrylamide）

• 1%（w/v）甲叉双丙烯酰胺（BIS）

• 单体:交联剂 = 29:1

配制方法（约1L 体系）

1. 称取 290g 丙烯酰胺和 10g BIS（甲叉双丙烯酰胺），置于1L烧杯中。

2. 加入约 600ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解（溶解过程可适当加热至37℃助溶，但温度不宜过高）。

3. 用去离子水定容至 1L，充分混匀。

4. 使用 0.45μm滤器 过滤去除不溶性杂质。

5. 转移至棕色瓶中，4℃避光保存。

关键操作要点

• 神经毒性防护（最重要）：丙烯酰胺为强神经毒性物质，可通过皮肤吸收，毒性具有累积性。称量及配制全程必须佩戴丁腈手套、防护眼镜和实验服，建议在通风橱内操作。聚丙烯酰胺（聚合后）无毒，但凝胶中可能含有少量未聚合的单体，操作时仍需谨慎。

• 过滤除杂：配制后必须使用0.45μm滤器过滤，去除未溶解的颗粒和杂质，否则会影响凝胶均匀性和电泳条带清晰度。

• 避光保存：丙烯酰胺见光易分解，必须使用棕色瓶或铝箔包裹容器，4℃避光保存。在暗处可稳定存放数周至数月。

• 有效期判断：若溶液颜色变黄或出现沉淀，提示丙烯酰胺已水解或聚合失效，应废弃重配。正规方法可用pH检测（新鲜溶液pH应为4.9～5.2）。

• pH值：本溶液无需调节pH，其自然pH值应在4.9～5.2之间（适合后续凝胶聚合）。

凝胶浓度选择参考

*注：上表为分离胶配制参考值（10ml体系下30%储液用量），实际配制请按具体配方表操作。