40%（W/V）Acrylamide – 19:1 高浓度丙烯酰胺/BIS制胶液（1L 配制）

40%（W/V）Acrylamide – 19:1 高浓度丙烯酰胺/BIS制胶液（1L 配制）

产品用途

本产品为高浓度聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）制胶原料，适用于高分辨率SDS-PAGE蛋白电泳、DNA测序凝胶及小分子量核酸片段的分离分析。40%的高浓度储备液在配制低浓度凝胶时灵活性更高，且19:1的单体/交联剂比例（丙烯酰胺:BIS = 19:1）交联度略高于29:1，形成的凝胶孔径更小，对小分子量蛋白质和核酸片段的分离效果更佳。尤其适合需要高分辨率分离的低分子量蛋白（<15kDa）及DNA测序/微卫星分析等应用。

核心组分及终浓度（40%）

• 38%（w/v）丙烯酰胺（Acrylamide）

• 2%（w/v）甲叉双丙烯酰胺（BIS）

• 单体:交联剂 = 19:1

配制方法（1L 体系）

1. 称取 380g 丙烯酰胺和 20g BIS（甲叉双丙烯酰胺），置于1L烧杯中。

2. 加入约 600ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解（高浓度溶解较慢，可适当加热至37℃～50℃助溶，温度不宜过高以防水解）。

3. 用去离子水定容至 1L，充分混匀。

4. 使用 0.45μm滤器 过滤去除不溶性杂质。

5. 转移至棕色瓶中，4℃避光保存。

30%与40% Acrylamide对比与选择建议

选择建议：常规蛋白SDS-PAGE使用30%（29:1）即可；若需分离小分子量蛋白（<15kDa）、DNA测序凝胶或追求更高分辨率，推荐使用40%（19:1）。40%浓度更高，配制低浓度凝胶时用量更少，灵活性更强。

关键操作要点

• 神经毒性防护（最重要）：丙烯酰胺为强神经毒性物质，可通过皮肤吸收，毒性具有累积性。称量及配制全程必须佩戴丁腈手套、防护眼镜和实验服，建议在通风橱内操作。聚丙烯酰胺（聚合后）无毒，但凝胶中可能含有少量未聚合的单体，操作时仍需谨慎。

• 高浓度溶解技巧：40%浓度较高，丙烯酰胺在常温下溶解较慢，可于磁力搅拌器上持续搅拌，或加热至37～50℃助溶（严禁超过60℃，以防水解），待完全溶解后冷却至室温再定容。

• 过滤除杂：配制后必须使用0.45μm滤器过滤，去除未溶解的颗粒和杂质，否则会影响凝胶均匀性和电泳条带清晰度。

• 避光保存：丙烯酰胺见光易分解，必须使用棕色瓶或铝箔包裹容器，4℃避光保存。在暗处可稳定存放数周至数月。

• 有效期判断：若溶液颜色变黄或出现沉淀，提示丙烯酰胺已水解或聚合失效，应废弃重配。新鲜溶液pH值应在4.9～5.2之间。