1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 7.4 / 7.6 / 8.0）– 1L 配制

1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 7.4 / 7.6 / 8.0）– 1L 配制

产品用途

1 M Tris-HCl是分子生物学实验室中最基础、最常用的缓冲液之一，广泛用于DNA/RNA提取、蛋白提取、凝胶电泳、酶反应缓冲液配制及各类生化分析实验。Tris（三羟甲基氨基甲烷）是一种弱碱，与盐酸配制的Tris-HCl缓冲体系在pH 7.0～9.0范围内具有优良的缓冲能力。本品提供三种常用pH规格（7.4、7.6、8.0），满足不同实验对酸碱度的特定需求，经高温高压灭菌后可直接使用或作为储备液配制其他工作缓冲液。

核心组分及终浓度（1M）

• 1 M Tris碱（Tris base，分子量121.14）

• 浓盐酸（HCl）调节至目标pH值（7.4 / 7.6 / 8.0）

配制方法（1L 体系）

1. 称取 121.1 g Tris碱，置于1L烧杯中。

2. 加入约 800 ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸（约12N），调节至目标pH值（必须待溶液冷却至室温后用pH计精确测定）：

（注：实际用量会因Tris批号、浓盐酸浓度及温度略有差异，应以pH计读数调整为准。）

4. 加去离子水定容至 1L，充分混匀。

5. 分装至适当容器，高温高压灭菌（121℃，20min）。

6. 灭菌后室温密封保存。

三种pH规格的典型应用场景

关键操作要点

• 温度对pH的影响（最重要）：Tris溶液的pH值随温度变化显著，温度每升高1℃，pH值约降低0.03个单位。例如：4℃时pH为8.8的Tris溶液，25℃时约为8.2，37℃时约为8.0。配制时必须在目标使用温度的同一温度下测定pH（通常建议在25℃室温下调定）。

• 浓盐酸加入量参考：表中数据为估算值（以浓盐酸约12N计），实际加入量应以pH计读数为准。浓盐酸加入速度应缓慢，避免局部过酸或过热，建议边加边搅拌并在通风橱内操作。

• 安全防护：浓盐酸具强挥发性和腐蚀性，操作时须在通风橱内进行，佩戴手套、护目镜。

• 灭菌后pH复核：高温高压灭菌可能导致pH轻微变化（≤±0.1），若对pH精度要求严格，可使用无菌1M HCl或1M NaOH进行微调。

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