1.5M Tris-HCl（pH8.8）– SDS-PAGE分离胶缓冲液（1L配制）

1.5M Tris-HCl（pH8.8）– SDS-PAGE分离胶缓冲液（1L配制）

产品用途

1.5M Tris-HCl（pH8.8）是SDS-PAGE蛋白电泳中分离胶（下层胶）的核心缓冲体系，为蛋白质在电泳过程中的分子筛分离提供稳定的高pH环境（pH8.8）。在碱性条件下，SDS-蛋白复合物带负电荷，在电场作用下向正极迁移，凝胶的分子筛效应依据分子量大小实现蛋白质的分离。本溶液经高温高压灭菌，可直接用于配制分离胶。

核心组分及终浓度（1.5M）

• 1.5M Tris碱（Tris base，分子量121.14）

• 浓盐酸（HCl）调节pH至8.8

配制方法（1L体系）

1. 称取 181.7g Tris碱，置于1L烧杯中。

2. 加入约 800ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解。

3. 缓慢加入浓盐酸，边加边搅拌，用pH计调节pH至 8.8（必须待溶液冷却至室温后测定）。

4. 加去离子水定容至 1L，充分混匀。

5. 分装至适当容器，高温高压灭菌（121℃，20min）。

6. 灭菌后室温密封保存。

SDS-PAGE浓缩胶与分离胶缓冲液对比

关键操作要点

• 温度对pH的影响（最重要）：Tris溶液的pH值随温度变化，温度每升高1℃，pH值约降低0.03个单位。配制时必须待溶液冷却至室温（25℃）后用pH计精确测定和调节pH值，不可在热时调pH。

• 浓盐酸加入量：1.5M Tris-HCl（pH8.8）通常约需8～10ml浓盐酸（12N），具体用量应以pH计读数为准，缓慢加入、边加边测。

• 安全防护：浓盐酸具强挥发性和腐蚀性，操作时须在通风橱内进行，佩戴手套、护目镜。

• 灭菌后pH复核：高温高压灭菌可能导致pH轻微变化（≤±0.1），若对pH精度要求严格，可使用无菌1M HCl或1M NaOH进行微调。