5×Tris-Glycine Buffer – SDS-PAGE蛋白电泳缓冲液（1L 配制）

5×Tris-Glycine Buffer – SDS-PAGE蛋白电泳缓冲液（1L 配制）

产品用途

5×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE电泳缓冲液）是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）的核心运行缓冲液，用于蛋白电泳过程中作为电极缓冲液，维持电泳体系的离子强度和pH稳定性，使SDS-蛋白复合物在电场作用下从浓缩胶进入分离胶，依据分子量大小实现蛋白质的高效分离。本产品为5倍浓缩液，使用时需稀释至1×工作浓度。Western blot、蛋白纯化分析、抗体纯度鉴定等实验均需使用本缓冲液。

核心组分及终浓度（5×）

• 0.125M Tris碱 – 维持缓冲体系的pH稳定性

• 1.25M 甘氨酸（Glycine） – 提供电泳过程中的跟随离子

• 0.5%（W/V）SDS（十二烷基硫酸钠） – 阴离子去污剂，使蛋白保持变性状态并均匀带负电荷

配制方法（1L 体系）

1. 称取以下各组分，置于1L烧杯中：

• 15.1g Tris碱

• 94g 甘氨酸（Glycine）

• 5.0g SDS

2. 加入约 800ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解（SDS溶解较慢，需充分搅拌至无颗粒）。

3. 加去离子水定容至 1L，充分混匀。

4. 室温保存。

各组分功能详解

使用方法

• 稀释至1×工作浓度：取200ml 5×浓缩液，加去离子水定容至1L，即为1×Tris-Glycine电泳缓冲液。

• 电泳条件：推荐恒压电泳——浓缩胶80～100V，分离胶120～200V（依凝胶长度和蛋白分子量调整）。

• 缓冲液更换：电泳缓冲液建议现配现用，不宜长期反复使用（离子强度变化和SDS损耗会影响电泳效果）。

关键操作要点

• SDS溶解：SDS为强力发泡剂且溶解较慢，称量及搅拌时动作不宜过猛，避免大量泡沫影响定容。可于磁力搅拌器上温和搅拌至完全溶解。

• 无需调节pH：本配方无需额外调节pH值。Tris + Glycine体系在5×浓度下pH自然稳定在约8.3（25℃），稀释至1×工作液时pH约为8.3，符合SDS-PAGE电泳条件。

• 室温保存：本溶液室温密封保存即可，SDS在低温下可能析出结晶。若出现结晶，置于37℃水浴加热溶解并摇匀后使用。

• 废液处置（重要）：含SDS的电泳废液严禁直接倒入下水道，因SDS对水生物有毒且不易降解，必须按实验室有机溶剂/表面活性剂废液标准分类收集处理。

• 现配现用建议：长期存放（尤其是室温超过25℃时）建议每2～4周新鲜配制，避免缓冲能力下降或长菌。

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