PBS Buffer – 磷酸盐缓冲液（1L 配制）

PBS Buffer – 磷酸盐缓冲液（1L 配制）

产品用途

PBS（磷酸盐缓冲液）是生物学和生物化学实验中最基础的缓冲液之一，广泛用于细胞培养（细胞洗涤、解离、稀释）、免疫学实验（Western blot、ELISA、免疫荧光、免疫组化的洗涤和抗体稀释）、分子生物学实验（核酸和蛋白的透析、稀释）以及组织样本处理（组织洗涤、匀浆缓冲液）。PBS具有生理pH（7.4）和生理离子强度，渗透压与哺乳动物体液等渗，对细胞和组织具有良好的生物相容性。本产品为1×工作液浓度，可直接使用，也可根据需要添加CaCl₂和MgCl₂等二价阳离子。

核心组分及终浓度（1×）

• 137mM 氯化钠（NaCl） – 维持渗透压和离子强度

• 2.7mM 氯化钾（KCl） – 补充钾离子

• 10mM 磷酸氢二钠（Na₂HPO₄） – 缓冲体系碱性组分

• 2mM 磷酸二氢钾（KH₂PO₄） – 缓冲体系酸性组分

• pH 7.4（25℃）

配制方法（1L 体系）

1. 称取以下各组分，置于1L烧杯中：

• 8.0g NaCl

• 0.2g KCl

• 1.42g Na₂HPO₄

• 0.27g KH₂PO₄

2. 加入约 800ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解。

3. 滴加浓盐酸或稀HCl，用pH计调节pH至 7.4（室温下测定）。

4. 加去离子水定容至 1L，充分混匀。

5. 分装至适当容器，高温高压灭菌（121℃，20min）。

6. 灭菌后室温密封保存。

各组分功能详解

使用方法

• 细胞培养：用于贴壁细胞洗涤（去除残留血清和培养基成分），常温或37℃预热后使用。

• 免疫学实验：作为Western blot、ELISA、免疫荧光等实验的洗涤液和抗体稀释液（可添加0.05～0.1% Tween-20配制成PBST）。

• 组织处理：作为组织匀浆、灌流和样本运输的基础缓冲液。

• 补充二价阳离子：如实验需要含Ca²⁺和Mg²⁺的PBS，可在灭菌前加入：

• 1mM CaCl₂（无菌操作或灭菌前加入）

• 0.5mM MgCl₂（无菌操作或灭菌前加入）
  注：含Ca²⁺/Mg²⁺的PBS不宜高压灭菌（可能导致磷酸盐沉淀），建议配制后过滤除菌。

关键操作要点

• pH精确调节：PBS的pH直接影响细胞活性和抗体-抗原结合效率，必须在室温下用pH计精确调至7.4，不可仅用pH试纸估算。

• 无二价阳离子（注意）：本配方为不含Ca²⁺和Mg²⁺的PBS，适用于需要避免二价阳离子的实验（如细胞解离、EDTA处理等）。若实验需要二价阳离子（如细胞黏附实验），可补充1mM CaCl₂和0.5mM MgCl₂。含二价阳离子时灭菌方式建议改为过滤除菌，避免高温导致磷酸盐沉淀。

• 灭菌与保存：灭菌后pH可能轻微变化（≤±0.1），一般不影响使用。室温密封保存可稳定数月至一年。

• 污染判断：若溶液出现浑浊、絮状沉淀或长菌，应废弃重新配制。

• 稀释倍数核实：本配方为1×工作液浓度，可直接使用。若误购10×PBS浓缩液，需稀释10倍后使用。

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