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20%(W/V)Glucose – 葡萄糖溶液(100ml 配制)

发布时间:2026-07-15      点击次数:0


20%(W/V)Glucose – 葡萄糖溶液(100ml 配制)

产品用途

20%葡萄糖溶液是微生物培养和分子生物学实验中常用的添加剂,主要应用于LB培养基等细菌培养基的营养补充(提供碳源,促进菌体生长)、感受态细胞制备(如SOC培养基中葡萄糖成分的来源)、发酵培养中的补料,以及酵母培养等实验。本品为高浓度葡萄糖储备液,使用前按实验需求稀释至适宜工作浓度。

核心组分及终浓度

  • 20%(W/V)葡萄糖(Glucose,分子量180.16)

配制方法(100ml 体系)

  1. 称取 20g 葡萄糖,置于100~200ml烧杯中。

  2. 加入约 80ml 去离子水,磁力搅拌至完全溶解。

  3. 加去离子水定容至 100ml,充分混匀。

  4. 过滤除菌(0.22μm滤器),不可高温高压灭菌。

  5. 分装成小份(如10ml或20ml/份),4℃密封保存

各组分功能详解

组分功能关键说明
葡萄糖碳源和能源细菌和酵母等微生物生长的主要能量来源

使用方法

  • LB培养基补料:按1:100~1:1000比例加入培养基中(终浓度0.2~2%),促进菌体快速生长。

  • SOC培养基:SOC培养基中葡萄糖终浓度为20mM(约3.6g/L),即1L SOC培养基中加入约18ml 20%葡萄糖溶液。

  • 感受态细胞制备:在特定培养基配方中按比例添加,提供碳源支持细胞生长。

  • 发酵补料:发酵过程中按需流加,维持碳源供应。

关键操作要点

  • 严禁高温高压灭菌(最重要):葡萄糖在高温高压下会发生焦化(炭化),溶液变黄甚至变褐。焦化产物对细菌有毒性,会导致细菌生长缓慢或感受态转化效率极低。因此不可高温高压灭菌,必须采用过滤除菌(0.22μm滤器)方式灭菌。

  • 过滤除菌操作:使用0.22μm无菌滤器过滤除菌,接收容器需预先灭菌。若溶液粘稠导致过滤缓慢,可使用更大直径滤器或正压过滤装置。

  • 分装保存:建议小份分装(如10~20ml/份),避免大瓶反复取用引入污染。

  • 保存条件:4℃可保存数月。若发现溶液变浑浊、长菌或有异味,应立即丢弃,不可继续使用。

  • 外观判断:新鲜配制的葡萄糖溶液应为无色透明。若溶液变黄或变褐,说明已有焦化产物或微生物污染,应废弃重配。

常见问题排查

问题现象可能原因解决方法
溶液变黄/变褐高温高压灭菌导致焦化改用0.22μm过滤除菌
溶液变浑浊微生物污染废弃重配,注意无菌操作
过滤速度极慢溶液粘稠或滤器孔径太小使用更大直径滤器或正压装置
菌体生长缓慢葡萄糖焦化产生毒性物质重新配制,严格过滤除菌

相关推荐

  • LB培养基 – 细菌基础培养基(需添加葡萄糖作为碳源补充)

  • SOC培养基 – 含葡萄糖的感受态细胞复苏培养基

  • TB培养基(Terrific Broth) – 含甘油的高密度培养培养基

  • M9最小培养基 – 含葡萄糖作为唯一碳源的合成培养基

  • 20%阿拉伯糖 – 诱导型启动子(如araBAD)常用诱导剂母液


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